甜瓜抗蔓枯病基因位点的分子标记方法

摘要

本发明涉及一种甜瓜抗蔓枯病基因的分子标记方法，属于生物技术领域。有四个AFLP分子标记与抗蔓枯病基因连锁，标记EcoRI－TG/MseI－CTC₂₀₀为200bp条带；标记EcoRI－AT/MseI－CTG₉₀为90bp条带；EcoRI－TC/MseI－CAG₆₀为60bp条带；标记EcoRI－TG/MseI－CTA70为70bp条带；连锁距离分别为2.0，6.0，5.4和6.0cM。通过本发明提供的分子标记方法检测PI 420145及其衍生品种(系)中是否含有该基因，预测其蔓枯病抗性水平，提高选择效率，有利于加速我国优良抗蔓枯病甜瓜品种的选育进程，生产上用于抗蔓枯病甜瓜品种纯度鉴定。

主权项

1.甜瓜PI420145抗蔓枯病基因的分子标记方法，其特征在于，该抗性基因为完全显性，有四个AFLP标记与之连锁，分别为：1)标记EcoRI-TG/MseI-CTC200，用AFLP选择性标记引物EcoRI-TG： 5′-GACTGCGTACCAATTCTG-3′和MseI-CTC： 5′-GATGAGTCCTGAGTAACTC-3′组合扩增出长度为200bp的DNA标记片段条带；2)标记EcoRI-AT/MseI-CTG90，用AFLP选择性标记引物EcoRI-AT： 5′-GACTGCGTACCAATTCAT-3′和MseI-CTG： 5′-GATGAGTCCTGAGTAACTG-3′组合扩增出长度为90bp的DNA标记片段条带；3)EcoRI-TC/MseICAG60，用AFLP选择性标记引物EcoRI-TC： 5′-GACTGCGTACCAATTCTC-3′和MseI-CAG： 5′-GATGAGTCCTGAGTAACAG-3′组合扩增出长度为60bp的DNA标记片段条带；4)标记EcoRI-TG/MseI-CTA70，用AFLP选择性标记引物EcoRI-TG：5′-GACTGCGTACCAATTCTG-3′和MseI-CTC：5′-GATGAGTCCTGAGTAACTC-3′组合扩增出长度为70bp的DNA标记片段条带；即用上述1)-4)组标记引物中任一对、二对、三对或四对引物扩增甜瓜PI 420145抗蔓枯病材料的DNA，如果扩增出其对应大小的标记片段条带，则标志着甜瓜PI 420145抗蔓枯病基因的存在。