ENSAYO DE INTENSIDAD FLUORESCENTE PARA HIBRIDACION DE ACIDOS NUCLEICOS DUPLEX Y TRIPLEX EN SOLUCION UTILIZANDO INTERCALADORES FLUORESCENTES.

摘要

Método para ensayar enlaces, dicho método comprendiendo: proveer un objetivo comprendiendo ADN bicatenario; proveer una sonda comprendiendo ADN monocatenario o ARN imperfectamente complementario a por lo menos una porción de dicho objetivo; proveer un agente intercalable, donde dicho agente intercalable comprende un fluoróforo; añadir dicha sonda, dicho objetivo y dicho agente intercalable a un medio de hibridación para proveer una muestra de ensayo; irradiar dicha muestra de ensayo con radiación de excitación para hacer que dicho fluoróforo emita radiación fluorescente; detectar una intensidad de dicha radiación fluorescente, donde dicha intensidad es una indicación directa de una afinidad de enlace entre dicha sonda y dicho objetivo; calibrar dicha intensidad contra las intensidades expuestas por otras sondas combinadas con dicho objetivo y dicho agente intercalable, cada una de dichas sondas difiriendo de dicha sonda en al menos una base; y determinar de dicha calibración una extensión de desajuste entre dicha sonda y dicho objetivo, donde dicho método es un ensayo homogéneo conducido sin amplificación por PCR de dicho objetivo y sin desnaturalizar dicho objetivo.