一种重组甲基营养杆菌及其应用

摘要

本发明公开了一种重组甲基营养杆菌及其应用。本发明的重组甲基营养杆菌是将glyA基因插入到载体pLAFR3的多克隆位点，得到重组表达载体pLAFRg，再将pLAFRg通过三亲本杂交导入到甲基营养杆菌MB200中，得到重组甲基营养杆菌MB202。MB202在10mg甘氨酸，50mg甲醇，10⁸－10⁹CFU菌体量，pH8.5的50mM Tris－HCl至终体积1mL的条件下，32℃摇床培养48小时，L－丝氨酸的产量达11.5mg/mL；MB202在32℃条件下，发酵培养12小时后，丝氨酸羟甲基转移酶的酶活达115U。本发明在利用重组甲基营养杆菌MB202的静息细胞生产L－丝氨酸、在处理甲醇废水中都有具有十分广泛的应用前景。

主权项

1.一种重组甲基营养杆菌，是将丝氨酸羟甲基转移酶基因插入到原核细胞表达载体的多克隆位点，得到重组表达载体，再将所述重组表达载体导入大肠杆菌中得到重组菌，以该重组菌作为供体菌，以转入帮助质粒pRK2073或pRK2013的重组大肠杆菌为帮助菌，以甲基营养杆菌(Methylobacterium sp.)MB200为受体菌，通过三亲本杂交将所述重组表达载体导入到甲基营养杆菌(Methylobacterium sp.)MB200中，得到重组甲基营养杆菌；所述甲基营养杆菌(Methylobacterium sp.)MB200的保藏号为CGMCCNo1526。