检测痕量H<SUB>2</SUB>O<SUB>2</SUB>的酶催化四丁基溴化铵共振散射光谱法

摘要

本发明公开了检测痕量H₂O₂的酶催化四丁基溴化铵共振散射光谱法。主要特征是在酸性条件下，利用辣根过氧化物酶(HRP)可以催化H₂O₂并与过量的I^－反应生成I₃^－，I₃^－与四丁基溴化铵(TBA)等形成缔合物微粒(TBA－I₃)_n，该缔合物微粒存在共振散射效应，H₂O₂浓度在一定范围内与TBA体系的共振散射强度呈良好的线性关系，据此而建立的灵敏度高，选择性好，简便快速的检测痕量H₂O₂方法。本发明的优点在于：设备简单、操作方便，只需要荧光分光光度计即可完成；试剂易得，成本低廉；底物碘化钾无毒；灵敏度高，检出限为43.7nmol/l；快速，反应只需要35分钟，有较好的应用价值。

主权项

1.检测痕量H2O2的酶催化四丁基溴化铵共振散射光谱法，其特征是：测定方法包括步骤如下：(1)制备已知H2O2浓度的测试体系，在具塞刻度试管中加入HAc-NaAc缓冲液，再分别加入KI、HRP和已知不同浓度的H2O2，摇匀，将摇匀后的溶液置于热水浴锅中，然后再加入TBAB，用二次蒸馏水稀释定容，得到已知H2O2 浓度的测试体系；(2)用步骤(1)的方法，制备试剂空白对照体系；(3)用荧光光度计同步扫描得到体系的共振散射光谱，在468nm波长处测定各体系的共振散射强度I468nm和试剂空白I0，计算ΔI468nm＝I468nm-I0值；(4)依照已知浓度的测试体系的ΔI与H2O2浓度的对应关系作工作曲线；(5)依照步骤(1)的方法制备检测体系，其中加入的H2O2为未知浓度的被测物，按步骤(3)的方法求得被测物的ΔI；(6)再根据步骤(4)的工作曲线，计算出被测物的H2O2浓度。