识别水禽共同IgY抗原的单克隆抗体及其制备方法

摘要

本发明的识别水禽共同IgY抗原的单克隆抗体及制备方法属于生物技术领域，涉及抗体工程技术。用辛酸－硫酸铵盐析法和Superdex 200凝胶层析法从斑头雁、鸬鹚、鸭和鹅的血清中提取IgY蛋白；用纯化的IgY蛋白联合免疫BALB/c小鼠，用小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合，以HAT培养基选择性培养，用15种水禽IgY蛋白进行间接ELISA筛选和有限稀释法克隆化，获得分泌抗15种水禽共同IgY抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其中2A12、5D4、3A8和5H9识别水鸟和水禽IgY轻链，7D3、6A2和6D11识别水鸟和水禽IgY重链，其腹水的ELISA效价为0.5－1.0×10⁶，Ig亚型重链为IgG1，轻链为κ。本发明为水鸟和水禽流行病尤其是禽流感抗体检测提供诊断试剂。

主权项

1.一种识别15种水禽共同IgY抗原的单克隆抗体，所述15种水禽为斑头雁、鸿雁、鸬鹚、夜鹭、白鹭、遗鸥、斑尾塍鹬、中杓鹬、绿翅鸭、花脸鸭、赤颈鸭、斑嘴鸭、麻鸭、番鸭和鹅，其特征在于：该单克隆抗体是用纯化的斑头雁、鸬鹚、鸭和鹅的血清IgY蛋白为抗原进行联合免疫，通过杂交瘤细胞方法筛选获得的能特异识别上述15种水禽共同IgY抗原的单克隆抗体。