发明名称 | 从哺乳动物凝固血中提取基因组DNA的方法 | ||
摘要 | 本发明公开了一种从哺乳动物凝固血中提取基因组DNA的方法,该方法包括以下步骤:1)将剪碎的哺乳动物凝固血用双蒸水清洗去除血红素,再将其与裂解液按体积比为3-5∶5混合,向混合液中加入蛋白酶K至终浓度为360-400mg/mL混合液,然后将混合液在55-65℃下水浴3-6小时至溶液中不再有粘稠的团块;2)将步骤1)获得的混合液与5.5-6.5M NaCl溶液和氯仿按体积比为1∶0.5-0.9∶1.5-1.9混合后,振荡,再离心,留上清;3)将上清液与体积/体积百分浓度为90-100%的冰乙醇按体积比1∶0.8-1.2混匀,得到的白色沉淀为基因组DNA。本发明将在哺乳动物基因组DNA的提取及奶牛或其它畜种的功能基因组研究中发挥重要作用,应用前景广阔。 | ||
申请公布号 | CN101153309A | 申请公布日期 | 2008.04.02 |
申请号 | CN200710121677.0 | 申请日期 | 2007.09.12 |
申请人 | 中国农业大学 | 发明人 | 张沅;刘锐;孙东晓;张毅;张剑 |
分类号 | C12P19/34(2006.01) | 主分类号 | C12P19/34(2006.01) |
代理机构 | 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人 | 关畅 |
主权项 | 1.一种从哺乳动物凝固血中提取基因组DNA的方法,包括以下步骤:1)将剪碎的哺乳动物凝固血用双蒸水清洗去除血红素,再将其与裂解液按体积比为3-5∶5混合,向混合液中加入蛋白酶K至终浓度为360-400mg/mL混合液,然后将混合液在55-65℃下水浴3-6小时至溶液中不再有粘稠的团块;所述裂解液由NaCl、Na2-EDTA和SDS组成,它们的浓度依次为140-160mM、40-60mM和1-2克/100毫升裂解液;2)将步骤1)获得的混合液与5.5-6.5M NaCl溶液和氯仿按体积比为1∶0.5-0.9∶1.5-1.9混合后,振荡,再离心,留上清;3)将上清液与体积/体积百分浓度为90-100%的冰乙醇按体积比1∶0.8-1.2混匀,得到的白色沉淀为基因组DNA。 | ||
地址 | 100094北京市海淀区圆明园西路2号 |