一种高通量的通过细菌直接侵染将外源基因导入昆虫细胞的方法

摘要

本发明提出了一种新的将外源基因导入昆虫细胞的方式，它是将目标基因通过分子操作克隆到昆虫瞬时表达载体或杆状病毒基因组上，鉴定正确的重组子克隆的菌体，培养到OD值0.5至0.8，收集的菌体和培养的昆虫细胞以100∶1－500∶1的比例混合后，大肠杆菌进入昆虫细胞并在其中破裂，释放出内容物，质粒携带的外源基因在昆虫细胞中表达。杆状病毒基因组还可以在相应的昆虫细胞宿主中包装成杆状病毒粒子。本发明真正能做到高通量，简便，廉价，高效地将外源基因导入到昆虫细胞中表达以制备抗原，生产蛋白质药物和研究其生物学功能。整个操作过程不需要配制其他试剂；无需专门的仪器设备；无需购买昂贵的转染试剂；也不需要订购高效率的试剂盒来制备高纯度的质粒。

主权项

1.一种高通量的通过细菌直接侵染将外源基因导入昆虫细胞的方法，其特征在于将感兴趣的目标基因通过分子操作克隆到昆虫瞬时表达载体或杆状病毒基因组上，鉴定正确的重组子克隆的菌体，培养到OD值0.5至0.8后，收集的菌体和培养的昆虫细胞以100∶1-500∶1的比例混合后，大肠杆菌进入昆虫细胞并在其中破裂，释放出内容物，质粒携带的外源基因在昆虫细胞中表达，杆状病毒基因组还可以在相应的昆虫细胞宿主中包装成杆状病毒粒子。