发明名称 |
一种用枯草芽孢杆菌发酵制备脱苦氨肽酶的方法及应用 |
摘要 |
一种用枯草芽孢杆菌发酵制备脱苦氨肽酶的方法及应用,属于酶制剂、食品添加剂技术领域。本发明涉及利用枯草芽孢杆菌Zj016发酵生产,发酵液通过乙醇分级沉淀,获得氨肽酶制品;本发明还涉及这种氨肽酶的应用,这种氨肽酶与碱性蛋白酶协同水解大豆分离蛋白,水解4h水解度(DH)可达25.03%,且水解液无苦味,能很好地解决了用其它酶生产大豆肽易产生苦味的难题。 |
申请公布号 |
CN101139580A |
申请公布日期 |
2008.03.12 |
申请号 |
CN200710025864.9 |
申请日期 |
2007.08.07 |
申请人 |
江南大学 |
发明人 |
田亚平;须瑛敏;魏亚娟 |
分类号 |
C12N9/56(2006.01);C12N1/20(2006.01);C12R1/125(2006.01) |
主分类号 |
C12N9/56(2006.01) |
代理机构 |
无锡市大为专利商标事务所 |
代理人 |
时旭丹;刘品超 |
主权项 |
1.枯草芽孢杆菌脱苦氨肽酶的制备方法,其特征是:A枯草芽孢杆菌发酵,收集发酵液:(1)出发菌株:采用枯草芽孢杆菌Zj016为出发菌株;(2)发酵培养基组成:玉米淀粉33~42g/L,豆渣粉27~35g/L,KH2PO4·12H2O 0.16~0.32g/L,K2HPO4 2.68~5.0g/L,NaCl 1g/L,MgSO4·7H2O0.1~0.3g/L,0.1mol/L的CoCl2 1~3ml,用氢氧化钠调pH7.5;(3)发酵条件:接种量8%,初始pH7.5~8,35~40℃,200~400rpm,培养15~16h;(4)收集发酵液:将发酵液4℃ 10000rpm离心10min后,弃沉淀,收集上清液;B用乙醇分级沉淀:(1)向收集的上清液中加入-20℃乙醇,使乙醇终浓度为20%进行第一次醇沉,4℃以10000rpm离心10min后,弃沉淀,收集上清液;(2)往第一次醇沉后的上清液中加入-20℃乙醇,使乙醇终浓度为40%进行醇沉,4℃以10000rpm离心10min后,弃上清,取沉淀;(3)沉淀加入少量pH8.5含0.1mmol/LCoCl2的Tris-HCl缓冲液溶解,4℃以10000rpm离心10min后,弃沉淀,收集上清液,即为氨肽酶溶液。 |
地址 |
214122江苏省无锡市蠡湖大道1800号 |