发明名称 以病毒持续性感染细胞系统筛选抗黄病毒感染化合物之方法
摘要 本发明系提供一种抗黄病毒感染化合物之筛选方法。具体而言,本发明系以病毒持续感染性细胞系统筛选抗黄病毒之天然或人工合成化合物。本发明之筛选方法包含(a)制备黄病毒持续性感染细胞株(persistent virusinfected cell lines),(b)使用该黄病毒持续性感染细胞株制备单株抗体,(c)将预选定化合物与黄病毒持续性感染细胞株接触(共同培养)及(d)使用该单株抗体经由免疫酵素法测定该预选定合物对黄病毒之抑制性。
申请公布号 TWI294036 申请公布日期 2008.03.01
申请号 TW094105533 申请日期 2005.02.24
申请人 财团法人佛教慈济综合医院 发明人 陈立光
分类号 G01N33/53(2006.01);G01N33/52(2006.01);C12N5/06(2006.01) 主分类号 G01N33/53(2006.01)
代理机构 代理人 陈昭诚 台北市中正区博爱路35号9楼
主权项 1.一种抗黄病毒感染化合物之筛选方法,系包括下 列步骤:(a)制备黄病毒持续性感染细胞株(persistent flavivirus infected cell lines),(b)使用该黄病毒持续性 感染细胞株制备单株抗体,(c)将预选定之化合物与 黄病毒持续性感染细胞株接触及(d)使用该单株抗 体经由免疫酵素法测定该预选定之化合物对该黄 病毒抗原之抑制性。 2.如申请专利范围第1项之筛选方法,其系用于由天 然化合物中筛选抗黄病毒感染化合物。 3.如申请专利范围第1项之筛选方法,其系用于由人 工合成化合物中筛选抗黄病毒感染化合物。 4.如申请专利范围第1项之筛选方法,其中,该黄病 毒持续性感染细胞株系使用悬浮性细胞株制得者 。 5.如申请专利范围第4项之筛选方法,其中,该悬浮 性细胞株为K562细胞株。 6.如申请专利范围第1项之筛选方法,其中,该黄病 毒持续性感染细胞株系使用吸附性细胞株制得者 。 7.如申请专利范围第6项之筛选方法,其中,该吸附 性细胞株为BHK-21细胞株、B2-5细胞株或Bcl-2表现BHK- 21细胞株。 8.如申请专利范围第1项之方法,其中,该预选定化 合物与该黄病毒持续性感染细胞株接触之方法系 将两者共同培养。 9.如申请专利范围第1项之筛选方法,其中,该免疫 酵素法为酵素连结免疫吸附分析(enzyme-link immunosorbent assay;ELISA)。 10.如申请专利范围第9项之筛选方法,其中,该酵素 联结免疫吸附分析为三明治酵素联结免疫吸附分 析(sandwich ELISA)。 11.如申请专利范围第9或10项之筛选方法,其中,于 该免疫酵素法中用于免疫酵素法之抗体可为单一 之单株抗体或多个单株抗体之混合物。 12.如申请专利范围第1项之筛选方法,其中,该单株 抗体为对该黄病毒之抗原决定基具有专一性者。 13.如申请专利范围第12项之筛选方法,其中,该单株 抗体为对该黄病毒之非结构性蛋白(NS1)的抗原决 定基具有专一性。 14.如申请专利范围第11项之筛选方法,其中,该单株 抗体为对该黄病毒之封套蛋白(E protein)的抗原决 定基具有专一性。 图式简单说明: 第1图为本发明之化合物筛选系统之设计图; 第2图为本发明之sandwich ELISA之简单图式; 第3图为登革热病毒第2型持续感染细胞培养上清 液中含有分泌之病毒抗原以sandwich ELISA测定之结 果。
地址 花莲县花莲市中央路3段707号