检测高危型人乳头瘤病毒的方法及试剂盒

摘要

本发明涉及检测临床样品中宫颈癌、尖锐湿疣的病原体—高危型人乳头瘤病毒(HR－HPV)存在的方法及试剂盒，特别是涉及以实时定量荧光聚合酶链反应技术诊断HR－HPV感染的方法及所使用的试剂盒。

主权项

1.一种使用实时荧光定量聚合酶链反应技术定量检测样品中常见高危型HPV病毒存在的方法，该方法包括：(1)提供包括HPV病毒基因组核酸的样品、核酸扩增体系，和荧光监测体系的反应与检测混合物，(2)通过扩增反应循环扩增所说的靶多聚核苷酸，(3)使所说的荧光发生基团与被扩增的靶多聚核苷酸间接结合，(4)确定荧光发生基团所产生的荧光量，并结合定量标准曲线确定靶多聚核苷酸的存在及其相对量；其中核酸扩增体系包括可与靶多聚核苷酸结合的寡核苷酸引物，并且荧光检测体系包括可与靶多聚核苷酸结合的寡核苷酸探针；特征在于所说的扩增反应中所使用的正向和反向寡核苷酸引物分别是5’-ttg atg aaaatg gca atc c-3’(SEQ ID NO：1)、5’-gac aaa aac gga aat cca gt-3’(SEQID NO：2)、5’-cat cgg tgt ctg cat ctt c-3’(SEQ ID NO：3)和5’-cat cgtttt cct tgt cct c-3’(SEQ ID NO：4)，并且所使用的寡核苷酸探针是5’-accatg tcc ttt caa aaa aac att tc-3’(SEQ ID NO：5)和5’-acc acg tcc ttgaga aaa agg att-3’(SEQ ID NO：6)。