乙醇酸的酶促生产

摘要

提供了由乙醇腈酶促生产乙醇酸的多种方法。这些方法包括：1)利用具有改善的用于将乙醇腈转化为乙醇酸的腈水解酶活性的敏捷食酸菌72W腈水解酶突变体，和2)改善催化剂稳定性和/或生产率的方法。该改善催化剂稳定性和/或生产率的方法包括利用反应稳定剂，在基本上无氧的条件下运行反应以及控制反应混合物中底物的浓度。

主权项

1.一种由乙醇腈生产乙醇酸的方法，包括：a)将适合的含水反应混合物中的乙醇腈与包含具有腈水解酶活性的多肽的酶催化剂接触，所述多肽具有SEQ ID NO：6的氨基酸序列，所述氨基酸序列具有至少一个选自以下的氨基酸取代：(1)在氨基酸残基第168位用赖氨酸、甲硫氨酸、苏氨酸或缬氨酸取代；和(2)在氨基酸残基第201位用谷氨酰胺、甘氨酸、组氨酸、赖氨酸、天冬酰胺、丝氨酸、丙氨酸、半胱氨酸或苏氨酸取代；由此产生乙醇酸；和b)以盐或酸的形式回收(a)中产生的乙醇酸；其中当在相同的反应条件下将乙醇腈转化为乙醇酸时，相对于敏捷食酸菌72W腈水解酶的腈水解酶活性，所述酶催化剂提供了至少1.5倍腈水解酶活性的增加。