利用大菱鲆鳍细胞系繁殖大菱鲆出血性败血症病毒的方法

摘要

一种利用大菱鲆鳍细胞系繁殖大菱鲆出血性败血症病毒的方法，它是以大菱鲆鳍细胞系细胞为繁殖体系，先将大菱鲆出血性败血症病毒接种至对数期大菱鲆鳍细胞系细胞上，22℃吸附2h后，加入含10％小牛血清的MEM培养液置22℃培养，并于病毒接种后第4天收获培养物，经-30℃冻融1次后，离心收集上清液中的大菱鲆出血性败血症病毒液。本发明所得的繁殖病毒，数量大，感染能力高，可直接用于病毒疫苗的制备与生产，提高养殖大菱鲆的存活率。

主权项

1.一种利用大菱鲆鳍细胞系繁殖大菱鲆出血性败血症病毒的方法，首先从病毒性出血性白血症病鱼的肝脏、脾、胃和肠组织中，利用组织匀浆和高速离心方法获得病毒液，并用0.45μm微孔滤膜过滤除菌；然后6.75ml病毒液接种至培养在500毫升培养瓶中的对数期大菱鲆鳍细胞系细胞上，在22℃吸附2h后，加入含10％小牛血清的最小必需培养基(MEM)培养液至22.5毫升，置于22℃培养箱中培养，并于接种病毒后第4天，收集培养物，经-30℃冻融1次后，离心收集大菱鲆出血性败血症病毒液上清。