一种制备藻蓝蛋白类荧光蛋白质的方法

摘要

本发明公开了一种制备藻蓝蛋白类荧光蛋白质的方法，通过应用藻胆蛋白beta裂合酶催化藻蓝胆素与藻蓝蛋白类脱辅基蛋白共价结合，制备藻蓝蛋白类荧光蛋白质；本发明的方法应用生物过程生产藻蓝蛋白类荧光蛋白质，是一种环境友好的生产方法；藻蓝蛋白类荧光蛋白质能应用于食品、保健与医药功能材料领域，特别是应用为生物和医学分子监测领域的荧光探针。

主权项

1.一种制备藻蓝蛋白类荧光蛋白质的方法，其特征在于它包括以下步骤：(1)采用基因工程方法，将beta裂合酶基因或其同源基因克隆于表达载体中，得到beta裂合酶表达质粒；应用基因工程方法将藻蓝蛋白类脱辅基蛋白基因或其同源基因克隆于第二个表达载体中，得到脱辅基蛋白表达质粒；应用基因工程方法将藻蓝胆素生物合成酶基因(hol和pcyA)或其同源基因克隆于第三个和(或)第四个表达载体中，得到藻蓝胆素合成质粒；(2)将beta裂合酶表达质粒或脱辅基蛋白表达质粒或藻蓝胆素生物合成酶质粒依次转入配套的宿主菌；当这些表达质粒都转入宿主菌后，得到相应的工程菌，应用此工程菌通过发酵工程能生产藻蓝蛋白类荧光蛋白质；发酵后，按常规蛋白质提纯技术，可提纯得到相应的藻蓝蛋白类荧光蛋白质。