一种从亚麻籽中提取纯化开环异落叶松树脂酚二葡萄糖苷的方法

摘要

一种从亚麻籽中提取纯化开环异落叶松树脂酚二葡萄糖苷的方法，属于农产品资源开发和功能性保健食品技术领域。本发明以粉碎的亚麻籽壳和/或亚麻籽粕为原料，采用低极性有机溶剂低温浸提脱脂，然后采用乙醇溶液提取，提取液中加入碱进行水解，中和并调pH，抽滤，减压浓缩，以无水乙醇复溶并微滤得到清液，滤液上凝胶柱进行分离纯化，得到开环异落叶松树脂酚二葡萄糖苷(SDG)产品。本发明克服了硅胶柱吸附分离时所用溶剂包含甲醇、氯仿和二氯甲烷等有毒溶剂的限制，本方法在安全性、经济性、制备规模和产品纯度上体现其优势，产品SDG的用途是功能性食品配料或保健食品。

主权项

1.一种从亚麻籽中提取纯化开环异落叶松树脂酚二葡萄糖苷的方法，其特征在于：以粉碎的亚麻籽壳和/或亚麻籽粕为原料，采用低极性有机溶剂低温浸提脱脂，然后采用乙醇溶液提取，提取液中加入碱进行水解，中和并调pH，抽滤，减压浓缩，以无水乙醇复溶并微滤得到清液，滤液上凝胶柱进行分离纯化；(1)粉碎：亚麻籽壳和/或亚麻籽粕粉碎到粒度为30～100目；(2)脱脂：按10～20mL/g亚麻籽粉加入低极性有机溶剂，在室温下搅拌1～2h，然后离心，上清液回收溶剂和亚麻籽油，残渣再次按5～10mL/g亚麻籽粉加入低极性有机溶剂在相同条件下脱脂；脱脂所用的低极性有机溶剂为正己烷或6号溶剂油；(3)提取：按5～30mL/g脱脂亚麻籽粉加入体积浓度40％～70％的乙醇溶液，在25～65℃搅拌提取2～4h，离心，残渣按5mL/g脱脂亚麻籽粉加入体积浓度40％～70％的乙醇溶液在25～65℃再次搅拌提取1h，然后离心；(4)水解：合并两次提取得到的清液，加入碱溶液使得最终碱液浓度在0.25～0.5M，在30℃下震荡或搅拌2h进行水解；(5)调节pH：水解结束后，水解液用酸中和碱并调节pH4～6；(6)抽滤、减压浓缩、复溶与微滤：采用孔径30μm中速滤纸抽滤中和后的悬浊液，然后以适量的体积浓度40％～70％的乙醇溶液洗涤残渣并合并滤液，将滤液在减压条件下浓缩至浓稠浆料状，加入适量无水乙醇复溶，然后用微滤膜进行微滤；所用滤膜为孔径0.45μm的微滤膜；(7)凝胶柱分离纯化：微滤液直接上柱，凝胶介质为Sephadex LH-20，柱长径比控制为70∶1，上样后以去离子水洗脱，线性流速在0.5～0.7cm/min，采用紫外检测仪在280nm下检测，洗脱液在280nm下无吸收峰时作为洗脱结束；样品洗脱后的凝胶柱介质以乙醇溶液清洗，供下一次凝胶柱分离纯化使用；(8)冷冻干燥及产物验证：凝胶柱分离得到的开环异落叶松树脂酚二葡萄糖苷组分，减压浓缩后经过冷冻干燥得到冻干粉，该冻干粉经过HPLC-MS、UV及NMR验证，确定开环异落叶松树脂酚二葡萄糖苷为产物的主要成分，含量在90％以上。