一种鲜切花百合的高效离体繁殖方法

摘要

本发明涉及鲜切花百合的高效离体繁殖方法——两步外植体法，将优质的东方杂交百合和麝香百合，于4℃暗藏使其脱春化，选择中等大小(50克)的鳞茎为初始外植体，通过直接分化的途径扩繁出芽。以该芽丛为次级外植体，进行增殖及壮苗培养、催根培养、试管苗驯化及移栽等步骤。不仅解决了以鳞茎直接作为种球存在的繁殖系数低且易发生种球退化问题，而且解决了以鳞茎为唯一外植体进行组织培养存在的污染率高、增殖率低、繁殖速度慢和移栽成活率低的关键问题，为鲜切花百合的生产提供培育优质种苗的技术途径，同时亦为鲜切花百合的大规模生产开发起到积极的推动作用，这具有十分重要的社会和经济效益。

主权项

1.一种鲜切花百合的离体繁殖方法，即两步外植体法，包括外植体的预处理、消毒、培养步骤，其特征在于：外植体的预处理：取优质的百合鳞茎于4℃暗藏使其脱春化；消毒：用流线型自来水冲洗过夜，先后用70％酒精、0.15％升汞消毒；培养：初始外植体诱导出芽：将初始外植体接种于MS+BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L+30g/L蔗糖+7g/L琼脂，pH＝5.8；培养条件为22-26℃，每日光照培养16小时，强度为1500lx；所述初始外植体为优质的百合鳞茎上的鳞片切块；次级外植体增殖及壮苗培养：从初始外植体上诱导的芽为次级外植体，接种于MS+BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L+30g/L蔗糖+7g/L琼脂，pH＝5.8；培养条件为22-26℃，每日光照培养16小时，强度为1500lx；次级外植体经继代培养后，接种于MS+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L，pH＝5.8；培养条件为22-26℃，每日光照培养16小时，强度为2000lx；催根培养：繁殖芽经壮苗培养后，接种于1/2MS+IBA0.25mg/L+GA0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L，pH＝5.8；培养条件为22-24℃，每日光照培养12小时，强度为1500lx；试管苗驯化及移栽：生根苗经2-3天的自然光炼苗后，移栽于灭菌的基质中，培养条件为20-22℃，每日光照培养12小时，强度为1500lx，20天后，移栽入大田；所述的基质为砂∶园土∶椰糠＝1∶1∶1。