微载体培养重组人组织型纤溶酶原激活剂TNK突变体的工艺

摘要

本发明公开一种采用Cytopore多孔微载体培养法生产重组人组织型纤溶酶原激活剂TNK突变体的新生产工艺，将TNK-tPA基因工程CHO细胞株加培养基重新悬浮后，转移至细胞培养瓶中培养，形成致密单层细胞；将上述细胞转入Wheaton搅拌器培养后，转移到Celligen反应器中，培养温度为37℃；pH＝7.1±0.1；溶氧为30～60％范围内；转速：起始转速为20rpm，4小时后逐渐增加转速，接种6小时达到40rpm，补充培养液及新鲜微载体进行培养20天，当细胞浓度达到一定水平后，即可进行收获。用Cytopore多孔微载体培养TNK-tPA基因工程细胞生产TNK-tPA，具有细胞密度大、成本低、表达水平高、表达产物比活高的特点，且操作简单，适合于大规模培养及产业化生产。

主权项

1、一种微载体培养生产重组人组织型纤溶酶原激活剂TNK突变体的工艺，在10L celligen灌注培养系统中采用Cytopore多孔微载体培养重组人组织型纤溶酶原激活剂TNK突变体的基因工程CHO细胞。