家猪B淋巴细胞刺激因子cDNA及其克隆方法和重组应用

摘要

猪B淋巴细胞刺激因子cDNA及其克隆方法和重组应用，涉及生物基因工程领域。猪B淋巴细胞刺激因子的基因，具有SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的序列。其克隆方法如下：根据B淋巴细胞刺激因子的保守序列设计引物；从猪脾脏提取总RNA；通过RT－PCR方法，扩增出一段cDNA，命名为P1，克隆入pMD18－T载体，测序；应用cDNA末端快速扩增方法，根据P1的序列设计正义引物及反义引物分别用以扩增出上述cDNA 3’－及5’－全长末端区域，扩增片段分别命名为P2及P3，分别克隆入pMD18－T载体，并测序；将P1、P2、P3拼接出cDNA全长序列，并设计首尾引物一步扩增出全长cDNA序列，克隆入pMD18－T载体，挑取阳性克隆进行测序。所述猪B淋巴细胞刺激因子的cDNA可通过现有基因工程方法，生产重组duck BAFF，作为猪类免疫增强剂。

主权项

1、猪B淋巴细胞刺激因子cDNA，其特征在于，具有SEQ ID NO.1所示的序列。