| 发明名称 | 一种获得目的mRNA的方法 | ||
| 摘要 | 本发明提供了一种获得目的mRNA的方法。该方法是将目的基因进行改造，在其3’末端引入oligo(dT)序列，然后分别在5’端和3’端加上限制性内切酶识别序列，并与载体结合，转化到大肠杆菌感受态细胞中，促使其高表达，提取大肠杆菌的总RNA，然后用oligo(dT)纤维素进行分离纯化，获得所需的目的mRNA。本发明提供的方法，可以方便地获得高纯度的所需的mRNA片段，用于相关基因PCR检测试剂盒的开发。 | ||
| 申请公布号 | CN100355887C | 申请公布日期 | 2007.12.19 |
| 申请号 | CN200410017218.4 | 申请日期 | 2004.03.25 |
| 申请人 | 华东理工大学 | 发明人 | 杨忠;赵建龙;马昱澍;肖君华;王锦之;魏东芝 |
| 分类号 | C12N15/10(2006.01);C12N15/70(2006.01);C12N15/66(2006.01);C12Q1/68(2006.01);G01N33/50(2006.01) | 主分类号 | C12N15/10(2006.01) |
| 代理机构 | 中原信达知识产权代理有限责任公司 | 代理人 | 罗大忱 |
| 主权项 | 1.一种获得目的mRNA的方法，其特征在于该方法包括如下步骤：①在目的基因的3’末端引入oligo(dT)序列，构建表达载体；②表达载体转化到大肠杆菌中；③转化后的大肠杆菌总RNA提取；④mRNA从总RNA中的分离纯化；所述的mRNA从总RNA中的分离纯化是将总RNA通过装填Oligo(dT)的纤维素柱，进行洗脱：其中oligo(dT)的数目为20-40。 | ||
| 地址 | 200237上海市梅陇路130号 | ||