生物转化反应中γ－氨基丁酸生成量的检测方法

摘要

生物转化反应中γ－氨基丁酸生成量的检测方法，它涉及一种γ－氨基丁酸生成量的检测方法。它解决了目前γ－氨基丁酸生成量的检测方法设备投资大，成本高，费时长和操作复杂的缺陷。检测步骤：a.取反应物和缓冲液加入微量呼吸仪的反应瓶主室，再将谷氨酸脱羧酶液加入反应瓶侧室；b.记录反应前平衡时左侧管内液柱高度h₁；c.记录反应后平衡时左侧管内液柱高度h₂；d.空白对照检测；e.运用公式0.004604×0.86884×K×N×[(h₂－h₁)－A]×100×1000计算。本发明整个检测过程所需时间为40min～75min，检测只需微量呼吸仪，投资少，操作简单易行，而且成本不到目前其它检测方法的一半。

主权项

1、生物转化反应中γ-氨基丁酸生成量的检测方法，其特征在于生物转化反应中γ-氨基丁酸生成量的检测按以下步骤进行：a.取1.00mL经过稀释的生物转化反应物和1.20mL、pH值为4.2的乙酸-乙酸钠缓冲液加入微量呼吸仪的反应瓶主室，再将0.30mL谷氨酸脱羧酶液加入微量呼吸仪的反应瓶侧室；b.将反应瓶浸入37℃水中10～30min，然后关闭反应瓶上检压计的三通活塞，使U形管右侧管内液柱下降至L1，5min后将U形管右侧管内液柱准确调整到L1，待U形管左侧管内液柱高度值h1稳定后记录；c.谷氨酸脱羧酶液流入反应瓶主室，37℃水浴振荡15～30min，然后准确将U形管右侧管内液柱调整到L1，待U形管左侧管内液柱高度值h2稳定后记录；d.空白对照检测：取2.50mL蒸馏水放入反应瓶主室，重复操作步骤b和c，并计算出空白对照检测中U形管左侧管内液柱高度记录值之差的绝对值A；e.运用公式0.004604×0.86884×K×N×[(h2-h1)-A]×100×1000进行计算，可得出100mL生物转化反应物生成γ-氨基丁酸的量；步骤e计算公式中K为反应瓶常数，N为生物转化反应物稀释倍数。