一种利用复合酶法从甘草废渣提取黄酮类物质的方法

摘要

本发明公开一种利用复合酶法从甘草废渣提取黄酮类物质的方法。通过以甘草废渣为原料，经醇提取，浓缩后用大孔吸附树脂吸附，经有机溶液洗脱收集总黄酮。浓缩回收溶剂，干燥后即得甘草总黄酮，其所得甘草总黄酮含量达到20％以上，杂质含量低，浓缩回收溶剂可以反复使用。采用该方法操作简便，可以充分利用或部分利用甘草加工企业原有设备，投资较少，且提取甘草总黄酮效率较高。

主权项

1、本发明提供一种利用复合酶法从甘草废渣提取黄酮类物质的方法，其方法步骤如下，(1).制备甘草渣提取液，通过以氯仿∶甲酸∶甲醇＝5∶0.5∶1为展层剂，以8％AlCl3为显色剂，进行硅胶薄板层析分析，确定甘草黄酮含量；(2).以中性纤维素酶和果胶酶复合酶在5mMol/L、pH6.0的磷酸缓冲液下，55℃作用2h处理甘草渣提取液，其中，中性纤维素酶的最适酶活为PH4.5-6.3，最适温度为55℃，添加量为50U/ml，果胶酶的最适酶活为PH4.0-6.1，最适温度为57℃，添加量为100U/ml；(3).将提取液加无水乙醇，采用料液比为1∶14，配制成80％乙醇溶液，煮沸1h，提取时间为40min，进行醇提，浓缩回收溶剂；(4).采用膨胀率为1.67的SP825树脂，其吸附率为91.04(mg/g)，在pH4.0-8.0条件下吸附浓缩后的甘草渣提取液；(5).选用高径比1∶15的层析柱，通过乙醇与水交替反复洗脱，采用乙酸乙酯为最佳洗脱溶剂，用量为树脂体积的2-3倍，在10-50℃的静态条件下，洗脱流速为10ml/h，过柱液的浓度2％，加液量为柱体积1/3，加样流速为20ml/h，交替洗脱2-3次，保持树脂分离使用前状态，同时收集总黄酮物质。