用于核酸扩增的引物、探针和方法

摘要

在PCR扩增，优选地LATE－PCR期间或之后利用荧光DNA染料和间接可激发标记引物和探针进行的同质检测改进了再现性和量化。非对称PCR扩增，优选地LATE－PCR期间或之后利用荧光DNA染料和间接可激发的经标记的容许错配的探针进行的低温同质检测允许对复杂目标进行分析。LATE－PCR扩增之后进行的定序样本制备方法降低了复杂性并允许“单管”处理。

主权项

1.一种用于分析非对称核酸扩增过程的至少一个单链扩增产物的方法，所述非对称核酸扩增过程通过由DNA聚合酶延伸寡核苷酸引物而产生双链和单链扩增子两者且包括至少一个引物退火温度，所述方法包含通过同质荧光检测来检测双链扩增子，在低于所述至少一个引物退火温度的温度下，通过序列特定同质荧光检测来检测所述至少一个单链扩增产物，和计算所述单链产物的荧光与所述双链扩增子的荧光的比率。