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Procedimiento para la introducción selectiva de un enlace doble en un entramado de esteroide mediante sobreexpresión de deshidrogenasas, caracterizado porque a) se aísla, clona y amplifica un gen de una deshidrogenasa procedente de una bacteria Bacillus sphaericus, b) se aíslan, clonan y amplifican los elementos promotor y terminador del gen de la deshidrogenasa u otros elementos promotores y terminadores procedentes de la misma u otra bacteria, c) se construyen plásmidos de expresión, en los que está contenido el gen de la deshidrogenasa procedente de a), flanqueado por las secuencias de promotor y de terminador del gen de la deshidrogenasa o de otros elementos promotores y terminadores procedentes de b), d) con el plásmido de expresión preparado en c) se transforman bacterias, y e) las bacterias producidas de esta manera se cultivan, y con estos cultivos se lleva a cabo una deshidrogenación selectiva en el entramado de esteroide, realizándose que i) se emplea una alta concentración de substrato con un período de tiempo de paso inalterado, y ii) no resultan zonas secundarias perturbadoras. |
