H9N2型禽流感NS1蛋白表达质粒pET－NS1

摘要

一种H9N2型禽流感NS1蛋白表达质粒pET-NS1。提供的pET-NS1表达质粒是通过将pET-32a(+)和经PCR扩增后含有限制性酶切位点的禽流感NS1基因酶切，连接，获得的表达质粒；pET-NS1表达质粒转化大肠杆菌BL21种，用IPTG诱导，即可表达出H9N2型禽流感NS1蛋白表达质粒pET-NS1的蛋白翻译区核苷酸序列，在这一段序列中包含H9N2型禽流感病毒NS1蛋白的核苷酸序列；还可表达出禽流感NS1蛋白表达质粒pET-NS1的蛋白翻译区氨基酸序列，这一段序列含有H9N2型禽流感NS1蛋白的氨基酸序列。本发明诱导表达的适用温度范围广，方便了样品的鉴定和纯化，使蛋白结构不受破坏。克服了纯化蛋白容易降解的缺点，可以在-40℃长时间保存。所表达的NS1蛋白还可用于禽流感病毒野毒感染的检测。

主权项

1、一种H9N2型禽流感NS1蛋白表达质粒pET-NS1，其特征在于，所提供的pET-NS1表达质粒是通过将pET-32a(+)和经PCR扩增后含有限制性酶切位点的禽流感NS1基因酶切，连接，获得的表达质粒；pET-NS1表达质粒转化大肠杆菌BL21中，用IPTG诱导，即可表达出H9N2型禽流感NS1蛋白表达质粒pET-NS1的蛋白翻译区核苷酸序列，即SEQ ID NO.1的序列，共计1197bp，SEQ ID NO.1第505-1197位核苷酸是H9N2型禽流感病毒NS1基因的核苷酸序列，共有693bp；还可表达出禽流感NS1蛋白表达质粒pET-NS1的蛋白翻译区氨基酸序列，即SEQID NO.2的氨基酸序列，共计398个氨基酸，SEQ ID NO.2第169-398位的氨基酸是H9N2型禽流感NS1蛋白的氨基酸序列，共计230个氨基酸。