氨基和羧基末端的同步序列分析

摘要

本发明涉及一种使用质谱分析通过推导氨基酸序列的羧基和氨基末端而识别多肽的新方法。所述方法包括以下步骤：用引发电子转移解离的负离子来解离带高电荷(例如Z＞4)的肽前体离子；然后除去上述反应物并引入第二型引发质子转移的负离子。调整第二PTR反应的持续时间，以便将ETD产物大部分都转化为+1电荷状态，以减少高电荷的c型和z型碎片，从而产生含有容易被解析的一系列c型和z型碎片离子的m/z谱，以便分别揭示氨基和羧基末端的序列。

主权项

1.一种测定多肽的氨基和羧基末端氨基酸序列的方法，所述方法包括：将所述多肽导入RF电场离子容纳装置中，其中所述多肽处于多电荷正离子状态；将气相电子转移反应物负离子导入所述离子容纳装置；将导入的电子转移反应物负离子或其衍生的电子转移反应物离子与所述多肽相混合，以便促进电子从电子转移反应物负离子或其衍生的电子转移反应物离子向所述多肽转移，从而产生解离产物正离子；将气相质子受体反应物负离子导入所述离子容纳装置；将导入的质子受体反应物负离子或其衍生的质子受体反应物离子与解离产物正离子相混合，以便促进质子从所述解离产物正离子向质子受体反应物负离子或其衍生的质子受体反应物离子转移，从而消减多电荷解离产物正离子上所带的电荷，使得余留的带电c型和z型碎片基本上由带四个或更少单位电荷的碎片组成；对所述余留带电碎片进行质量(m/z)分析；并且确定所述多肽的氨基和羧基序列。