使用腈水解酶突变体生产3－羟基羧酸

摘要

该发明涉及具有改善的用于将3－羟基腈转化为3－羟基羧酸的腈水解酶活性的腈水解酶突变体。更具体地说，使用易错PCR和位点定向诱变突变敏捷食酸菌72W(ATCC 55746)腈水解酶基因以产生具有改善的用于将3－羟基腈(如3－羟基丁腈或3－羟基戊腈)转化为相应的3－羟基羧酸的腈水解酶活性的腈水解酶。也提供了一种使用所述改善的突变体生产3－羟基羧酸的方法。

主权项

1.一种编码如SEQ ID NO：4的氨基酸序列所示的酶促活性多肽的分离的核酸分子，所述分离的核酸分子进一步包含至少一个引起SEQ ID NO：4的至少一个氨基酸取代的突变，所述取代选自：a)在第210位用丙氨酸、异亮氨酸或半胱氨酸取代；b)在第65位用半胱氨酸取代；c)在第168位用赖氨酸、缬氨酸或亮氨酸取代；和d)在第174位用异亮氨酸取代，其中所述核酸分子编码一种多肽，当在相同的反应条件下将3-羟基戊腈转化为3-羟基戊酸时，所述多肽与敏捷食酸菌72W(ATCC55746)腈水解酶的活性相比具有至少高1.8倍的腈水解酶活性。