发明名称 |
一种分泌型毕赤酵母菌株及其构建方法 |
摘要 |
本发明构建了一种新的分泌型毕赤酵母表达载体用于表达带组氨酸标签的重组D-氨基酸氧化酶。工程菌培养过程中能够分泌重组D-氨基酸氧化酶,与胞内表达D-氨基酸氧化酶的重组菌株相比较,免除了细胞破碎步骤。利用蛋白质工程在DAO基因的N端加上了6个组氨酸,利用金属螯合亲和层析一步法纯化就可以去除杂酶,简化了目的蛋白质提纯工艺。 |
申请公布号 |
CN100342002C |
申请公布日期 |
2007.10.10 |
申请号 |
CN200510028756.8 |
申请日期 |
2005.08.12 |
申请人 |
中国科学院上海生命科学研究院 |
发明人 |
杨晟;郑华宝;王筱兰;陈军;杨蕴刘;姜卫红 |
分类号 |
C12N1/19(2006.01);C12N15/63(2006.01);C12N15/53(2006.01);C12N15/81(2006.01);C12N15/65(2006.01);C12R1/84(2006.01) |
主分类号 |
C12N1/19(2006.01) |
代理机构 |
上海智信专利代理有限公司 |
代理人 |
缪利明 |
主权项 |
1、一种表达D-氨基酸氧化酶的分泌型毕赤酵母(Pichiapastoris)重组菌株,其特征在于,所述菌株转化有重组质粒pMMWY01,该重组质粒以三磷酸甘油醛脱氢酶基因为启动子,并含有D-氨基酸氧化酶基因和ZeocinTM抗性基因。 |
地址 |
200031上海市徐汇区岳阳路320号 |