通过酶促乙醇酸－乙醛酸循环反应测定髓过氧化物酶的方法和试剂盒

摘要

本发明提供用于检测髓过氧化物酶活性的方法。在所述检测中，将含有髓过氧化物酶或者怀疑含有髓过氧化物酶的样品与包括丝氨酸、过氧化氢和卤化物的底物相接触。如果样品中存在髓过氧化物酶，那么丝氨酸被转化成为乙醇醛，其进一步被glycoaldehyde转化酶(例如，乙醇醛脱氢酶)(1.2.1.21)转化为乙醇酸。然后，所述方法应用乙醇酸和乙醛酸之间的循环反应系统来产生与所述髓过氧化物酶活性相对应的可检测的信号。本发明还提供了基于相同的原理用于检测髓过氧化物酶的试剂盒。

主权项

1.一种用于检测样品中的髓过氧化物酶的方法，所述方法包括：a)将怀疑含有髓过氧化物酶的样品与丝氨酸、过氧化氢、和氯接触，以产生乙醇醛；b)在乙醇醛转化酶和以其氧化形式的第一电子受体的存在下，将步骤a)中产生的所述乙醇醛转化成为乙醇酸；c)在以其氧化形式的第二电子受体和乙醇酸转化酶的存在下，将步骤b)的所述乙醇酸转化成为乙醛酸，由此产生还原形式的第二电子受体；在以其还原形式的第三电子受体和乙醛酸转化酶的存在下，所述乙醛酸被转化回到乙醇酸，以形成循环反应系统，由此产生氧化形式的第三电子受体；其中所述第二电子受体和第三电子受体是不同的；和d)评估所述循环反应系统中还原或氧化形式的第二电子受体或者还原或氧化形式的第三电子受体的浓度变化，由此确定样品中髓过氧化物酶的存在、不存在和/或量。