建立草地早熟禾高频再生体系的方法

摘要

本专利对草地早熟禾Baron、Mardona、Midnight品种进行了组织培养研究，表明选择成熟种子作为外植体诱导愈伤组织，消毒时运用磁力搅拌消毒，蒸馏水洗净后直接接种为宜；选择易碎、干燥的胚性愈伤进行继代培养，在8个月内能够保持其再生能力；再生2个月的组培苗，移栽到花盆中能够100％成活，在田间生长健壮；运用正交设计与单因素实验设计的方法，建立了三种草地早熟禾品种的高频再生体系，胚性愈伤诱导率高达31.67％，愈伤组织分化率高达56.67％。运用其中Baron品种的再生体系进行基因枪转化，获得了转DREB1A、BADH-CMO、CMO基因的转化植株。

主权项

1、草地早熟禾高频再生方法，其特征在于选择Midnight品种的成熟种子作为外植体，经消毒处理后接种愈伤组织诱导培养基培养，获得愈伤组织后经继代培养将愈伤组织接种分化培养基培养，再经生根培养，直至得到再生植株，其中愈伤组织诱导培养基和继代培养基为：MS+2，4-D2mg/L+CuSO43mg/L+CH1g/L；其中分化培养基和生根培养基为：MS+6-BA1mg/L+LH0.5g/L。