一种治疗眼底出血中药制剂和血明目的质量检测方法

摘要

本发明属中药成方制剂领域，具体来说是涉及一种治疗眼底出血中药制剂和血明目的质量检测方法。本发明提供了对黄芩苷、大黄素、大黄酚、原儿茶醛的定性鉴别，制定出了最佳的供试品制备方法，找到了合适的展开剂，能对该制剂进行有效的定性鉴别。此外本发明改进了丹参中主要成分的含量测定方法，采用高效液相色谱法对丹参素进行含量测定，制定出了最佳的供试品制备方法和流动相配制方法，克服了原测定丹参中主要成分丹参酮IIA方法步骤多、时间长、有机溶剂用量多的缺点，大大提高含量检测的准确度。本方法的建立，有利于市场上对治疗眼底出血中药制剂和血明目的真伪优劣进行鉴别。

主权项

1、一种治疗眼底出血中药制剂和血明目的质量检测方法，将菊花、黄芩、半量的车前子、半量的蒲黄，混合粉碎成细粉，备用；剩余车前子、蒲黄与其余丹参、地黄、墨旱莲、决明子、茺蔚子、女贞子、夏枯草、龙胆、郁金、木贼、赤芍、牡丹皮、山楂、当归、川芎加水浸泡30分钟，煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过；滤液减压浓缩至60℃时相对密度为1.35～1.39的稠膏，加入上述细粉混合均匀，60℃烘干，粉碎成细粉，加入糊精，用85％乙醇制成颗粒，60℃烘干，整粒，加入硬脂酸镁，混匀，即得成品，其特征在于：包括以下步骤：(1)取本品0.3g，研细，加乙醇20ml，浸渍1小时后，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取墨旱莲对照药材1g，加乙醇20ml，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9∶1环己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中熏至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)取本品0.3g，研细，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩对照药材1g，加甲醇20ml，同法制成对照药材溶液；再取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以5∶3∶1∶1乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)取本品0.3g，研细，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，再加盐酸1ml，加热30分钟，立即冷却，用乙醚振摇提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液；另取决明子对照药材1g，加甲醇20ml，同法制成对照药材溶液；再取大黄素、大黄酚对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以15∶5∶1的60～90℃石油醚-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(4)取本品0.6g，研细，加热水30ml使溶解，用稀盐酸调节PH值为2-3，离心，取上清液用乙酸乙酯振摇提取二次，每次30ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取原儿茶醛对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以5∶6∶3∶1的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲苯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％三氯化铁乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(5)丹参素的含量测定对照品溶液的制备：取丹参素对照品5mg，精密称定，置50ml量瓶中，用50％甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取1ml，置10ml量瓶中，加50％甲醇至刻度，摇匀，即得每1ml中含丹参素0.01mg的对照品溶液；供试品溶液的制备：取本品0.6g，精密称定，研细，取1g，精密称定，置100ml量瓶中，加50％甲醇适量，超声处理30分钟，放冷，加50％甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；用高效液相色谱法测定：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以10∶90的甲醇-0.5％醋酸为流动相；检测波长为281nm；理论板数按丹参素峰计算应不低于1500；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，计算样品中丹参素的含量。