发明名称 |
溶藻弧菌poly(A)化mRNA的cDNA文库构建方法 |
摘要 |
一种溶藻弧菌poly(A)化mRNA的cDNA文库构建方法,以溶藻弧菌为材料,用提取总RNA、反转录、应用RD-PCR技术扩增反转录得到的双链DNA、分子克隆及ESTs生物信息学等方法对该菌进行研究。此方法具有质量高,所筛选的基因片段重复性低,筛选基因片段效率高,目的性强等特点。该文库应用了RD-PCR技术,对欲克隆的基因片段进行了扩增,由于酶切后片段大小较均一,可以有效地避免PCR对短片的优先扩增,防止所构建的cDNA文库出现明显偏向,在这点上优于一般PCR介导的cDNA文库构建法。该文库可以作为深入研究溶藻弧菌毒力因子以及致病机理的基础;能为研制新型基因工程疫苗提供新的思路。 |
申请公布号 |
CN101021015A |
申请公布日期 |
2007.08.22 |
申请号 |
CN200610124341.5 |
申请日期 |
2006.12.22 |
申请人 |
广东海洋大学 |
发明人 |
吴灶和;王蓓;简纪常;鲁义善 |
分类号 |
C40B40/06(2006.01);C40B50/06(2006.01);C12N15/31(2006.01) |
主分类号 |
C40B40/06(2006.01) |
代理机构 |
湛江市三强专利事务所 |
代理人 |
庞爱英 |
主权项 |
1、一种溶藻弧菌poly(A)化mRNA的cDNA文库构建方法,其特征是构建步骤包括:提取总RNA、反转录、应用RD-PCR技术扩增反转录得到的双链DNA、分子克隆及ESTs生物信息学5步方法。 |
地址 |
524025广东省湛江市霞山区解放东路40号 |