筛选编码抗原特异性免疫球蛋白分子或其抗原特异性片段的多核苷酸的方法

摘要

本发明涉及在真核细胞内表达免疫球蛋白分子的高效方法。本发明进一步涉及特别是利用三分子重组法制备免疫球蛋白重链和轻链文库以便在真核细胞内表达的方法。本发明还提供了选择和筛选抗原特异性免疫球蛋白分子及其抗原特异性片段的方法。本发明还提供了制备，筛选和选择抗原特异性免疫球蛋白分子的试剂盒。最后，本发明提供了通过文中提供的方法制备的免疫球蛋白分子及其抗原特异性片段。

主权项

1.一种选择编码抗原特异性免疫球蛋白分子或其抗原特异性片段的多核苷酸的方法，包括：(a)将经过可操纵地连接了转录调控区、编码多种第一免疫球蛋白亚基多肽的第一多核苷酸文库导入到能表达所述免疫球蛋白分子的真核宿主细胞群；其中每个第一免疫球蛋白亚基多肽包含：(i)选自重链恒定区和轻链恒定区的第一免疫球蛋白恒定区，(ii)与所述第一恒定区对应的免疫球蛋白可变区，以及(iii)能够指导所述第一免疫球蛋白亚基多肽的细胞表面表达或分泌的信号肽；(b)向所述宿主细胞内导入可操纵地连接了转录调控区的编码多种第二免疫球蛋白亚基多肽的第二多核苷酸文库；其中每个第二免疫球蛋白亚基多肽包含：(i)选自重链恒定区和轻链恒定区的第二免疫球蛋白恒定区，其中该第二免疫球蛋白恒定区与第一免疫球蛋白恒定区不同，(ii)与所述第二恒定区对应的免疫球蛋白可变区，以及(iii)能够指导所述第二免疫球蛋白亚基多肽的细胞表面表达或分泌的信号肽；其中所述第二免疫球蛋白亚基多肽能与所述第一免疫球蛋白亚基多肽组合形成免疫球蛋白分子或其抗原特异性片段；(c)允许所述宿主细胞表达免疫球蛋白分子或其抗原特异性片段；(d)将所述免疫球蛋白分子与抗原进行接触；以及(e)回收第一多核苷酸文库中编码第一免疫球蛋白亚基多肽的那些多核苷酸，所述第一免疫球蛋白亚基多肽作为免疫球蛋白分子或其抗原特异性片段的一部分，对所述抗原而言是特异的。