发明名称 玉米成熟胚途径的愈伤组织诱导及植株再生方法
摘要 本发明属于植物组织和细胞培养技术领域。具体涉及一种利用玉米自交系成熟胚途径的植株再生方法,其特征在于,先将所述的玉米自交系成熟胚诱导产生胚芽,由该胚芽诱导产生愈伤组织,选取其中的胚性愈伤组织,不经过继代培养,直接再生为完整植株。与现有技术相比,省略掉现有技术中工作量较大、耗时较长的继代过程,快速诱导胚性愈伤组织并直接转入分化过程产生绿苗。再生体系构建时间较现有技术显著缩短,并且扩大了能够应用植物组织培养技术的玉米自交系种类。
申请公布号 CN101011031A 申请公布日期 2007.08.08
申请号 CN200710063649.8 申请日期 2007.02.07
申请人 华中农业大学 发明人 王世玉;张小波;张方东;郑用琏
分类号 A01H4/00(2006.01);A01C1/00(2006.01);C12N5/04(2006.01) 主分类号 A01H4/00(2006.01)
代理机构 北京路浩知识产权代理有限公司 代理人 张红兵
主权项 1、一种利用玉米自交系成熟胚途径的植株再生方法,其特征在于,先将所述的玉米自交系成熟胚诱导产生胚芽,由该胚芽诱导产生愈伤组织,选取其中的胚性愈伤组织,不经过继代培养,直接再生为完整植株,它包括如下步骤:a)将消毒后的玉米种子放在含有2,4-D的铺有湿滤纸的培养瓶中诱导萌发,得到胚芽;b)切取a)得到的胚芽并将该胚芽轴向切成两半作外植体,将其切面向下置于诱导培养基上,诱导出愈伤组织;c)从步骤b)的愈伤组织中挑选胚性愈伤组织接种到分化培养基上得到丛生苗;d)将步骤c)得到的丛生苗分成单个苗,转入生根培养基上再生为完整植株,所述的培养基如下:愈伤组织诱导培养基:N6大量元素+N6微量元素+B5有机物+甘氨酸2.0mg/L+L-脯氨酸0.69g/L+水解酪蛋白1g/L+蔗糖30g/L+2,4-D 3mg/L+L phytagel2.5g/+AgNO310mg/L,补充水分至1L,pH5.8;愈伤组织分化培养基:N6大量元素+N6微量元素+B5有机物+甘氨酸2.0mg/L+蔗糖30g+phytagel2.5g/L+6-BA0.6mg/L,补充水分至1L,pH5.8;生根培养基:1/2 MS基本培养基+IBA 0.5mg/L+蔗糖15g/L+phytagel2.5g/L,补充水分至1L,pH5.8。
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