发明名称 为转基因克隆动物提供高表达细胞核的方法
摘要 本发明提供一种为转基因克隆动物提供高表达细胞核的方法,解决载体中乳腺启动子难以在成纤维细胞中发挥作用,并且由此而产生的难以鉴别外源基因表达水平的问题;主要是采取细胞融合方法,用转染人生长激素基因的鼠胚成纤维细胞与具备分泌功能的人乳腺癌细胞株MCF-7/S细胞相融合,融合细胞具备了乳腺启动子(βLG)发挥作用的条件,使融合细胞分泌人生长激素;本发明暂时避开了一系列有待解决的理论问题,在融合后放免分析中即可筛选出在转基因细胞水平上表达量较高的细胞克隆作为核供体,简便易行,大大节省人力物力。
申请公布号 CN101008016A 申请公布日期 2007.08.01
申请号 CN200610048016.5 申请日期 2006.10.10
申请人 大连医科大学 发明人 杨佩满;刘勃;邵淑娟;赵谨瑶;胡军;杨进
分类号 C12N15/85(2006.01);C12N15/08(2006.01);C12N5/28(2006.01);C12Q1/04(2006.01) 主分类号 C12N15/85(2006.01)
代理机构 大连科技专利代理有限责任公司 代理人 龙锋
主权项 1一种为转基因克隆动物的建立提供高表达细胞核的方法,其特征在于:用脂质体转染法将载有人生长激素基因片断的质粒转入小鼠胚成纤维细胞并首先获得转基因的核供体细胞系,其与具备分泌功能的人乳腺癌细胞MCF-7/S相融合,融合细胞具备了乳腺启动子βLG发挥作用的条件可分泌人生长激素,通过人生长激素的分泌量,选择可供核移植的高表达人生长激素的细胞克隆。
地址 116027辽宁省大连市中山路465号大连医科大学组胚教研室
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