发明名称 |
高效表达水蛭素及其生产方法 |
摘要 |
本发明涉及一种生物工程的抗栓药物及其生产方法,具体而言是涉及一种新型水蛭素及其生产方法。采用全人工合成的方法获得变异的HV2全基因,在其5’端上游加入一段合适前导序列。构建毕赤酵母分泌型表达载体pHV2,载体转化宿主细胞GS115,并整合入宿主细胞的染色体中。筛选高效表达菌株,经优化发酵诱导、分离纯化步骤,提高了重组基因产物的生产效率,产物表达水平和生物学活性,以及对抗凝、抗栓的药效学研究表明,高于文献报道,这为水蛭素II型的大规模生产和临床应用的深入研究提供了物质来源。 |
申请公布号 |
CN1328380C |
申请公布日期 |
2007.07.25 |
申请号 |
CN01141415.4 |
申请日期 |
2001.09.24 |
申请人 |
天津天士力制药股份有限公司 |
发明人 |
赵凯;吴祖泽;苑宾;张津辉;李满文;熊志红;蒋中华;董春娜;曹菊荣;于爱平 |
分类号 |
C12N15/15(2006.01);C12N15/63(2006.01);C12N15/64(2006.01);C07K14/815(2006.01) |
主分类号 |
C12N15/15(2006.01) |
代理机构 |
|
代理人 |
|
主权项 |
1、一种新型编码水蛭素的DNA分子,其特征在于该DNA分子与来源于水蛭的天然的水蛭素2型DNA分子相比,该DNA分子的第121位核苷酸由胞苷酸变异为鸟苷酸、第156位核苷酸由胸苷酸变异为胞苷酸,第157位核苷酸由腺苷酸变异为鸟苷酸;其前导序列为CTCGAGAAAAGA。 |
地址 |
300402天津市北辰科技园辽河东路1号 |