一种氯霉素人工抗原的制备方法

摘要

一种氯霉素人工抗原的制造方法，是将氯霉素溶于无水吡啶中，并加入琥珀酸酐，使氯霉素分子导入了羧基，加交联剂EDAC和6－氨基己酸，使氯霉素衍生物中的羧基与6－氨基己酸中的氨基缩合，增长了碳链，然后与载体蛋白质进行偶联，得到氯霉素—碳链—载体蛋白复合物，该复合物是一种氯霉素人工抗原。同现有技术比较，本发明的优点是偶联方法简便易行，将本氯霉素—碳链—载体蛋白复合物用于动物体氯霉素残留量检测及免疫检测上，有助于提高检测水平。

主权项

1.一种氯霉素人工抗原的制备方法，其特征在于采用以下步骤：A)按重量比为1∶0.3～0.5分别称取氯霉素和琥珀酸酐，先后加入到无水吡啶中，无水吡啶用量按1克氯霉素加5-20毫升比例添加，在封闭容器中或在回流装置中水浴6-24h，生成含有羧基的氯霉素衍生物；B)将上述氯霉素衍生物置于离心管中，加入氯霉素原反应体积的5-10倍的冰冷1-5N盐酸量，离心管以每分钟1000转的转速转动10分钟，析出含有羧基的氯霉素红色产物，再用2-10倍体积的1-5N盐酸冰冷的盐酸溶液离心洗涤沉淀2-3次，得到紫红色沉淀物；C)向沉淀物中加入浓度为40～75％的乙醇溶液，沉淀物溶解后加入氯霉素重量20～50％的水溶性碳化二亚胺EDAC，在常温下反应5-10分钟后，加入氯霉素重量30～50％的6-氨基己酸，生成带有碳链手臂的氯霉素；D)在带有碳链手臂的氯霉素中加入氯霉素重量20～50％的水溶性碳化二亚胺，反应5-10分钟后，再加入氯霉素重量50-200倍重量的待偶联的蛋白质进行偶联反应，经过透析，除去未能偶合的自由小分子化合物，获得氯霉素—碳链—载体蛋白复合物，该复合物为一种氯霉素人工抗原。