D－氨甲酰水解酶的突变体及其应用

摘要

本发明公开了D－氨甲酰水解酶的四个突变体及其在生产D－对羟基苯甘氨酸中的应用，属于生物工程领域。通过定向进化技术获得的突变酶1的第18位的氨基酸由丙氨酸突变为苏氨酸，突变酶2的第30位的氨基酸由酪氨酸突变为天冬酰胺，突变酶3的第34位的氨基酸由赖氨酸突变为谷氨酸，在此基础上进行了三个位点叠加突变，获得突变酶4。这四个突变酶具有更高的可溶性表达水平，并在D－对羟基苯甘氨酸的生产中表现出更高的酶活力。

主权项

1、一种D-氨甲酰水解酶的突变体，其特征在于，具有以下任一项所述的氨基酸序列：A、SEQ ID NO：2所示的D-氨甲酰水解酶的氨基酸序列中第18位的丙氨酸突变为苏氨酸；B、SEQ ID NO：2所示的D-氨甲酰水解酶的氨基酸序列中第30位的酪氨酸突变为天冬酰胺；C、SEQ ID NO：2所示的D-氨甲酰水解酶的氨基酸序列中第34位的赖氨酸突变为谷酰胺；D、SEQ IDNO：2所示的D-氨甲酰水解酶的氨基酸序列中第18位的丙氨酸突变为苏氨酸，第30位的酪氨酸突变为天冬酰胺，且第34位的赖氨酸突变为谷酰胺。