一种土壤微生物DNA的提取方法

摘要

本发明提供了一种土壤微生物DNA的提取方法，所述的方法包括土壤微生物细胞裂解、粗DNA溶液的获得、土壤微生物DNA的获得等步骤；本发明所述的方法是利用PVPP、蛋白酶K等化学物质的有效组合，通过PEG20000、异丙醇等有机溶剂的沉淀后，用分光光度计测定OD260/OD230、OD260/OD280值接近于标准值，可直接应用于分子操作，具有重大应用前景。

主权项

1.一种土壤微生物DNA的提取方法，其特征在于所述的方法步骤如下：(1)土壤微生物细胞裂解：土壤置于含蛋白酶K0.1～0.4g/L、交联聚乙烯吡咯烷酮0.01～0.02g/L的细胞裂解缓冲液中，50～60℃振荡30～60min后，每100mL裂解缓冲液加入1g表面活性剂，60～70℃温浴，离心，取上清液得细胞裂解液；(2)粗DNA溶液的获得：将步骤(1)所得细胞裂解液加入0.5～1倍体积的聚乙二醇溶液，室温沉淀1～3h后，离心，取沉淀，用TE溶液溶解，即得粗DNA溶液，所述TE溶液为10mMTris，1mM EDTA，pH8.0；(3)土壤微生物DNA的获得：将粗DNA溶液去蛋白，经分离纯化即得所述的土壤微生物DNA。