环二肽类化合物的生物制备方法及用途

摘要

本发明的环二肽类化合物的生物制备方法是以保藏编号为：CGMCC NO.0902的高效生物除草菌野油菜黄单胞菌反枝苋致病变种为菌种，经发酵、分离、提纯得多个环二肽类化合物，本发明方法简便可行，对环境没有污染；所用原料廉价，易于形成大规模批量生产，生产成本低，产率较高。经测定，本发明方法制得的环二肽类化合物对反枝苋、藜、决明、早熟禾、马唐等杂草表现出较好的生物除草活性。

主权项

1.式1所示的环二肽类化合物的生物制备方法，cyclo-(-A1-A2-)(式1)其中，A1为一种脂肪族氨基酸或一种芳香族氨基酸；A2为一种脂肪族氨基酸或一种芳香族氨基酸；其特征是包括以下步骤：1)以保藏编号为：CGMCC N0.0902的高效生物除草菌野油菜黄单胞菌反枝苋致病变种(Xanthomonas campestris pv.retroflexus)为菌种，在常规固体培养基中对该菌种进行斜面培养，复壮，25-30℃培养9-24h；然后进行种子培养，在400ml三角瓶中盛2/3体积的液体培养基，液体培养基的配方为：牛肉膏0.5-2.2％，蛋白胨0.2-4％，葡萄糖0.2-4％，NH4H2PO40.05-0.5％，NaCl0.1-2.0％，以水补足体积；调初始PH值为6.0-7.4，在121-125℃下灭菌20-30min，冷却后以1％的接种量接种，25-30℃培养12-32h；2)发酵罐中盛2/3体积的液体培养基，液体培养基的配方同上述种子液体培养基的配方，以6-12％的接种量接种，通气量按体积比为1∶0.6-1.5，25-30℃培养54-120h，得发酵液；3)发酵液离心得上清液，减压浓缩，用丙酮多次沉淀去除多糖，减压蒸去丙酮，将剩留液pH调至3-7，用等体积的乙酸乙酯提取数次，然后合并乙酸乙酯提取液，将其减压蒸馏浓缩至干，用1-5毫升的甲醇溶解，用硅胶柱分离，以石油醚∶乙酸乙酯按体积比从10∶1到4∶6梯度洗脱；再将盐酸水解后茚三酮显色的部分用硅胶柱分离，薄层层析法分析后将性质相同的组分合并，制得环二肽类化合物。