一种用固定化酶生产壳寡糖的方法

摘要

本发明涉及壳寡糖的制备，具体地说是一种用固定化酶生产壳寡糖的方法，按如下步骤进行操作：1)固定化介质的活化：将固定化介质与耦联剂反应，温度20-110℃，时间5-24小时，耦联剂的用量为3％-30％(v/v)；2)固定化酶的制备：将酶与活化的固定化介质于磷酸盐缓冲溶液中反应，使酶固定在介质的表面，反应体系的pH为3.0-8.0，温度0-25℃，时间24-48小时，酶的量为2-10mg酶/g湿重固定化介质；3)壳寡糖的制备：在搅拌条件下，将溶于反应介质中的壳聚糖与固定化酶进行酶降解反应，制得壳寡糖；反应结束后，过滤回收固定化酶。本发明的优点为：成本低，固定化酶可以重复使用，适应于规模化生产。

主权项

1.一种用固定化酶生产壳寡糖的方法，其特征在于按如下步骤进行操作：1)固定化介质的活化将固定化介质与耦联剂于液相介质中进行反应，反应温度为20-110℃，反应时间5-24小时，耦联剂的用量为反应体系体积的3％-30％；2)固定化酶的制备将酶与步骤1)活化的固定化介质于0-0.2M磷酸盐或醋酸盐缓冲溶液中进行反应，使酶固定在介质的表面，该反应体系的pH为3.0-8.0，反应温度为0-25℃，反应时间为24-48小时，酶的量为2-10mg酶/g湿重固定化介质；3)壳寡糖的制备在搅拌条件下，将溶于反应介质水或弱酸溶液中的壳聚糖，于30-50℃下，与步骤2)制备的固定化酶进行酶降解反应，壳聚糖与反应体系的重量体积比为0.5-3.0％，固定化酶与反应体系的重量体积比为2-10％，反应时间10-50小时，即制得壳寡糖；反应结束后，过滤回收固定化酶；所述固定化介质为分子筛、氧化铝、玻璃珠、吸附树脂或离子交换树脂；所述耦联剂为氨丙基三乙氧基硅烷、环氧氯丙烷或戊二醛；所述液相介质为有机相或水相。