一种混合床凝胶过滤层析技术用于病毒性疫苗纯化的方法

摘要

本发明一种混合床凝胶过滤层析技术用于病毒性疫苗纯化的方法，属于生物技术领域，其步骤为，将Sepharose 4FF凝胶与Sepharose 6 FF凝胶充分混匀后装填于柱中，将超滤浓缩后的病毒抗原上样于混合床柱进行凝胶过滤层析，获得纯化的病毒抗原。本发明提供了一种纯化效果好、抗原回收率高的病毒抗原纯化新方法，纯化的病毒抗原适合于制备疫苗。

主权项

1、一种混合床凝胶过滤层析技术用于病毒性疫苗纯化的方法，其步骤是：(1)采用组织培养技术或重组DNA技术收获病毒抗原；(2)取Sepharose 4FF和Sepharose 6FF凝胶，Sepharose 4FF凝胶与Sepharose 6FF凝胶混合的体积比为0.05∶1～20∶1，充分混匀后装填于柱中；(3)用0.1～0.5mol/L NaOH，以线流速10-100cm/h去除内毒素，维持时间2-10小时；(4)用含0.02～0.50mol/L氯化钠或氯化钾的平衡缓冲液平衡柱子；(5)对需要纯化病毒抗原，用截留分子量10～300kD的超滤膜进行超滤浓缩；(6)将浓缩后溶液上样于充分平衡的Sepharose 4 FF-Sepharose 6FF混合床柱，上样量为1～15％柱体积，洗脱液与平衡缓冲液相同；(7)分部收集，进行相应指标测定。