发明名称 一种以基因优化方法获得的抗草甘膦基因及其表达载体
摘要 本发明利用DNA序列同源重组的特性和传统PCR扩增法的热循环反应,设计出以两个或两个以上同源性大于50%的基因序列为源模板,并采用两步PCR扩增反应的简便高效的基因优化方法。并以此方法获得了两个发生多点突变的,具有较强草甘膦抗性的EPSP合成酶基因。其编码的酶具有比野生型低得多的K<SUB>[PEP</SUB>],而K<SUB>[草甘膦</SUB>]却明显增加。既提高了酶的催化效率,又减低了酶与草甘膦的亲和力,使该酶抵御草甘膦的能力大幅度提高。
申请公布号 CN1321184C 申请公布日期 2007.06.13
申请号 CN200510067122.3 申请日期 2001.05.24
申请人 中山大学 发明人 徐培林;何鸣;杨中艺
分类号 C12N15/52(2006.01);C12N15/31(2006.01);C12N15/63(2006.01);C12N15/70(2006.01);C12N1/21(2006.01) 主分类号 C12N15/52(2006.01)
代理机构 代理人
主权项 1.一种aroAM13的DNA序列,其特征是其所编码的具有草甘膦抗性的EPSP合成酶与大肠杆菌aroA基因所编码的氨基酸序列相比,只含有下列氨基酸置换:苏氨酸23→丝氨酸和精氨酸330→苏氨酸。
地址 510275广东省广州市新港西路135号
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