发明名称 |
一种以基因优化方法获得的抗草甘膦基因及其表达载体 |
摘要 |
本发明利用DNA序列同源重组的特性和传统PCR扩增法的热循环反应,设计出以两个或两个以上同源性大于50%的基因序列为源模板,并采用两步PCR扩增反应的简便高效的基因优化方法。并以此方法获得了两个发生多点突变的,具有较强草甘膦抗性的EPSP合成酶基因。其编码的酶具有比野生型低得多的K<SUB>[PEP</SUB>],而K<SUB>[草甘膦</SUB>]却明显增加。既提高了酶的催化效率,又减低了酶与草甘膦的亲和力,使该酶抵御草甘膦的能力大幅度提高。 |
申请公布号 |
CN1321184C |
申请公布日期 |
2007.06.13 |
申请号 |
CN200510067122.3 |
申请日期 |
2001.05.24 |
申请人 |
中山大学 |
发明人 |
徐培林;何鸣;杨中艺 |
分类号 |
C12N15/52(2006.01);C12N15/31(2006.01);C12N15/63(2006.01);C12N15/70(2006.01);C12N1/21(2006.01) |
主分类号 |
C12N15/52(2006.01) |
代理机构 |
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代理人 |
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主权项 |
1.一种aroAM13的DNA序列,其特征是其所编码的具有草甘膦抗性的EPSP合成酶与大肠杆菌aroA基因所编码的氨基酸序列相比,只含有下列氨基酸置换:苏氨酸23→丝氨酸和精氨酸330→苏氨酸。 |
地址 |
510275广东省广州市新港西路135号 |