一种检测土壤亚硝酸还原酶活性的分析方法

摘要

本发明涉及一种检测土壤亚硝酸还原酶活性的分析方法，1)称取土壤风干样品3份于3只试管中，其中2只试管中加入2－2.5ml 0.20％－0.25％的亚硝酸钠溶液，另1只试管中加入等量的蒸馏水，调pH为7－8.5；然后向3只试管中分别加入1－2ml 0.5％－1.0％的葡萄糖溶液，再用蒸馏水补充到5－10ml，封口，摇匀，30℃恒温嫌气培养24小时；2)加入铝钾矾饱和溶液；摇荡，过滤；3)取滤液加显色剂，在520nm下比色测定，测定吸光值A；4)计算样品中NO₂－N的含量。与过去的分析方法相比，本发明简化了操作步骤，从而减少了嫌气培养过程的复杂性和不确定性，使分析结果更加稳定可靠，重现性好。

主权项

1.一种土壤亚硝酸还原酶活性的分析方法，其特征在于：1)分别称取1g过筛的土壤风干样品3份于3只试管中，往其中2只试管中加入2-2.5ml 0.20％-0.25％的亚硝酸钠溶液，另1只试管中加入等量的蒸馏水作为样品对照，调PH为7-8.5；然后向3只试管中分别加入1-2ml0.5％-1.0％的葡萄糖溶液作为氢供体，再用蒸馏水补充到5-10ml，封口，摇匀，30℃恒温嫌气培养24小时；同时作试剂空白对照；2) 培养结束后，用蒸馏水将试管内的土液混合物完全转移至三角瓶中，再加入1ml铝钾矾饱和溶液；摇荡，过滤；3)取滤液1ml于50ml容量瓶中加显色剂，然后用水定容至刻度，在520nm下比色测定，测定吸光值A；4)在520nm下比色测定一系列已知浓度的NaNO2溶液的吸光值A1，以NaNO2溶液的浓度和测定的吸光值A′制备标准曲线，得到斜率b；5)根据吸光值A和斜率b，计算所测定液中NO2-N的含量S，S＝A*b；6)计算样品中NO2-N的含量；计算公式：[S1-(S2-S3)*50*V1/1000*V2]/W＝mgNO2 --N/g土·24h式中：S1为试剂空白中的NO2-N的含量mg/L，S2为样品中的NO2-N的含量mg/L，S3为样品对照中的NO2-N的含量mg/L，50为定容的溶液体积ml，V1为浸提液总体积ml，V2为吸取滤液的体积(ml)，W为称土样重g，1000为单位转换系数。