发明名称 |
基因工程生产用原核表达质粒载体——pKpL5及其构建方法 |
摘要 |
本发明公开了一种基因工程生产用原核表达质粒载体——pKpL5及其构建方法,其特征在于:在含有双启动子、双SD区、rrnb转录终止子的pKpL4原核质粒载体的起始码下游嵌入人工合成的六聚组氨酸编码区、16s rRNA3’端互补区、凝血酶识别位点编码区接头,三个接头的5’端分别含限制性核酸内切酶Nco I、Bam HI、Bam HI残存碱基。该质粒载体能大大提高目的基因的表达效率,从而提高目的蛋白的产量,我们使用该质粒载体表达人生存素单体、双体和利什曼原虫LACK抗原,经SDS-PAGE电泳后用Quantity ONE(Bio-Rad公司)软件分析,目的蛋白的表达量分别占全菌总蛋白量的5.1%,19%和35%。同时本发明还能简化目的蛋白的纯化程序,降低目的蛋白的生产成本。原核表达质粒载体——pKpL5可用作原核高效表达通用质粒载体表达各种目的的基因。 |
申请公布号 |
CN1966690A |
申请公布日期 |
2007.05.23 |
申请号 |
CN200610021542.2 |
申请日期 |
2006.08.05 |
申请人 |
川北医学院 |
发明人 |
敬保迁;马大龙;张洁 |
分类号 |
C12N15/63(2006.01) |
主分类号 |
C12N15/63(2006.01) |
代理机构 |
南充三新专利代理有限责任公司 |
代理人 |
许祥述 |
主权项 |
1、一种基因工程生产用原核表达质粒载体——pKpL5,其特征在于:在含有双启动子、双SD区、rrnb转录终止子的pKpL4原核质粒载体的起始码下游嵌入人工合成的六聚组氨酸编码区、16s rRNA3’端互补区、凝血酶识别位点编码区接头,三个接头的5’端分别含限制性核酸内切酶Nco I、Bam HI、Bam HI残存碱基。 |
地址 |
637000四川省南充市涪江路234号 |