发明名称 检棒分析中目标核酸之捕获及侦测的改良
摘要 叙述检棒分析中帮手探针之用途,在检棒分析中测试样品溶液中目标核酸之存在,样品溶液与检棒之接触端接触,使样品溶液藉由毛细作用移至检棒之捕获带而使目标核酸被捕获,藉由能杂交至目标核酸之捕获探针,目标核酸能于捕获带中被捕获。能够杂交至目标核酸之标示侦测探针可用以侦测捕获带之目标核酸。帮手探针可用以增强捕获及/或侦测探针结合至目标核酸,因此改良目标核酸侦测之敏感度。亦述及检棒及套组。
申请公布号 TWI281501 申请公布日期 2007.05.21
申请号 TW090116569 申请日期 2001.07.06
申请人 真世界诊断有限公司 发明人 梅格达亚那斯塔索法帝尼伐;尚克里斯多夫哈瑟伍;李海伦怀安
分类号 C12Q1/68(2006.01);G01N30/90(2006.01) 主分类号 C12Q1/68(2006.01)
代理机构 代理人 何金涂 台北市大安区敦化南路2段77号8楼;林荣琳 台北市大安区敦化南路2段77号8楼
主权项 1.一种测试样品溶液中目标核酸存在之方法,其包 含: a)提供一种层析片,其具有:接触端以接触样品溶液 ;以及一种捕获探针固定于层析片捕获带(位于接 触端之另一端)上,捕获探针能够杂交至目标核酸 第一序列; b)培育样品溶液与: 一种侦测探针,其在侦测探针连接至目标核酸之条 件下,能连接至目标核酸,因此可利用侦测探针来 直接或间接侦测目标核酸;以及一种第一帮手探针 ,能够杂交至目标核酸第二序列,藉此增强捕获探 针杂交至目标核酸,而样品溶液及第一帮手探针是 在第一帮手探针杂交至第二序列之条件下培育; c)层析片之接触端与样品溶液接触,故在侦测探针 、第一帮手探针及目标核酸间所形成之复合物能 藉由毛细作用移至捕获带,且藉由捕获探针杂交至 复合物之目标核酸而结合至捕获带;及 d)检查捕获带上侦测探针之存在。 2.一种测试样品溶液中目标核酸存在之方法,其包 含: a)提供一种层析片,其具有:接触端以接触样品溶液 ;及一种固定于层析片之捕获带(位于接触端之另 一端)的捕获部分; b)培育样品溶液与: 一种侦测探针,其在侦测探针连接至目标核酸之条 件下,能连接至目标核酸,因此可利用侦测探针来 直接或间接侦测目标核酸; 一种捕获探针,其在捕获探针杂交至第一序列之条 件下,能杂交至目标核酸第一序列,当捕获探针已 杂交至第一序列,捕获探针能够藉由捕获部分连结 ;及 一种第一帮手探针,其能杂交至目标核酸第二序列 ,藉此增强捕获探针杂交至目标核酸,而样品溶液 及第一帮手探针在第一帮手探针杂交至第二序列 之条件下培育; c)层析片之接触端与样品溶液接触,以便在侦测探 针、捕获探针、第一帮手探针及目标核酸间所形 成之复合物能藉由毛细作用移至捕获带,且藉由捕 获部分之连结至复合物之捕获探针而连结至捕获 带;及 d)检查捕获带上侦测探针之存在。 3.如申请专利第1或2项之方法,其中第二序列与第 一序列最多间隔10个核。 4.如申请专利第3项之方法,其中第二序列紧接于第 一序列。 5.如申请专利范围第1或2项之方法,其中样品溶液 与能够杂交至目标核酸第三序列的第二帮手探针 一起培育,藉此增强捕获探针杂交至目标核酸,在 第二帮手探针杂交至第三序列之条件下,培育样品 溶液及第二帮手探针。 6.如申请专利范围第5项之方法,其中第二及第三序 列位于第一序列之侧边。 7.如申请专利范围第6项之方法,其中第三序列与第 一序列最多间隔10个核。 8.如申请专利范围第7项之方法,其中第三序列紧接 于第一序列。 9.如申请专利范围第1或2项之方法,其中侦测探针 包含能够杂交至目标核酸之吊侦测探针,以及能 够杂交至吊侦测探针之一般侦测探针。 10.如申请专利范围第1或2项之方法,其中侦测探针 能够杂交至目标核酸第四序列以连结侦测探针至 目标核酸。 11.如申请专利范围第1或2项之方法,其中样品溶液 与能够杂交至目标核酸第五序列之第三帮手探针 一同培育,藉此可增强侦测探针杂交至第四序列, 第三帮手探针与样品溶液是在第三帮手探针杂交 至第五序列条件下培育。 12.一种测试样品溶液中目标核酸存在之方法,其包 含: a)提供一种层析片具有:接触端以接触样品溶液;及 一种固定于层析片捕获带(位于接触端之另一端) 的捕获探针,捕获探针能够杂交至目标核酸; b)样品溶液与杂交至目标核酸之帮手探针接触,藉 此增强捕获探针杂交至目标核酸,在帮手探针杂交 至目标核酸之条件下,将样品溶液与帮手探针接触 ; c)层析片之接触端与样品溶液接触,藉由毛细作用 使样品溶液移至捕获带,故在帮手探针及目标核酸 间所形成之复合物,能藉由捕获探针杂交至复合物 之目标核酸于捕获带被捕获;及 d)检查捕获带上目标核酸之存在。 13.一种测试样品溶液中目标核酸存在之方法,其包 含: a)提供一种层析片,其具有:接触端以接触样品溶液 ;及一种固定于层析片捕获带(位于接触端之另一 端)的捕获部分; b)样品溶液接触与: 一种捕获探针,其在捕获探针杂交至目标核酸之条 件下能够杂交至目标核酸,当捕获探针已杂交至目 标核酸,捕获探针能够藉由捕获部分连结;以及 一种帮手探针,能够杂交至目标核酸,藉此增强捕 获探针杂交至目标核酸,而样品溶液与帮手探针是 在帮手探针杂交至目标核酸之条件下接触; c)层析片之接触端与样品溶液接触,藉由毛细作用 使样品溶液移至捕获带,以便在捕获探针、帮手探 针及目标核酸间所形成之复合物,能藉由捕获部分 结合至复合物之捕获探针于捕获带被捕获;及 d)检查捕获带上目标核酸之存在。 14.如申请专利范围第12或13项之方法,其中捕获探 针包含能杂交至吊捕获之一般捕获探针。 15.一种测试样品溶液中目标核酸存在之方法,其包 含: a)提供一种层析片,其具有:接触端以接触样品溶液 ;及一种固定于层析片捕获带(位于接触端之另一 端)的捕获探针,捕获探针能够杂交至目标核酸第 一序列; b)培育样品溶液与: 一种侦测探针,其在侦测探针杂交至目标核酸之条 件下,能够杂交至目标核酸第二序列,藉此可利用 侦测探针来直接或间接侦测目标核酸;以及 一种第一帮手探针,能够杂交至目标核酸第三序列 ,藉此增强侦测探针杂交至第二序列,而样品溶液 及第一帮手探针在第一帮手探针杂交至第三序列 之条件下培育; c)层析片之接触端与样品溶液接触,以便在侦测探 针、第一帮手探针及目标核酸间所形成之复合物 能藉由毛细作用移至捕获带,且藉由捕获探针杂交 至复合物之目标核酸而结合至捕获带;及 d)检查捕获带上侦测探针之存在。 16.一种测试样品溶液中目标核酸存在之方法,其包 含: a)提供一种层析片,其具有:接触端以接触样品溶液 ;及一种固定于层析片捕获带(位于接触端之另一 端)的捕获探针; b)培育样品溶液与: 一种捕获探针,其在捕获探针杂交至第一序列之条 件下,捕获探针能够杂交至目标核酸第一序列,而 当捕获探针已杂交至第一序列,捕获探针能够被捕 获部分结合; 一种侦测探针,其在侦测探针杂交至第二序列之条 件下,能够杂交至目标核酸第二序列,藉此可利用 侦测探针来直接或间接侦测目标核酸;以及 一第一帮手探针,能够杂交至目标核酸第三序列, 藉此增强侦测探针杂交至目标核酸,而样品溶液及 第一帮手探针是在第一帮手探针杂交至第三序列 之条件下培育; c)层析片之接触端与样品溶液接触,以便在侦测探 针、捕获探针、第一帮手探针及目标核酸间所形 成之复合物能藉由毛细作用移至捕获带,且藉由捕 获部分结合至复合物之捕获探针而连结至捕获带; 及 d)检查捕获带上侦测探针之存在。 17.如申请专利范围第15或16项之方法,其中第三序 列与第二序列最多间隔10个核。 18.如申请专利范围第17项之方法,其中第三序列紧 接于第二序列。 19.如申请专利范围第15或16项之方法,其中样品溶 液与能够杂交至目标核酸第四序列的第二帮手探 针一起培育,藉此能够增强侦测探针杂交至目标核 酸,而样品溶液及第二帮手探针是在第二帮手探针 杂交至第四序列之条件下培育。 20.如申请专利范围第19项之方法,其中第三及第四 序列位于第二序列之侧边。 21.如申请专利范围第20项之方法,其中第四序列与 第二序列最多间隔10个核。 22.如申请专利范围第21项之方法,其中第四序列紧 接于第二序列。 23.如申请专利范围第15项或16项之方法,其中捕获 探针包含能杂交至吊捕获探针之一般侦测探针 。 24.如申请专利范围第15或16项之方法,其中探针杂 交至样品溶液中之目标核酸是在单一步骤中进行 。 25.一种测试样品溶液中目标核酸存在之方法,其包 含: a)提供一种层析片,其具有:接触端以接触样品溶液 ;一种固定于层析片捕获带(位于接触端之另一端) 的捕获探针,捕获探针能够杂交至目标核酸;以及 一种帮手探针可释放地固定于层析片接触端及捕 获带之间,帮手探针能够杂交至目标核酸,藉此增 强捕获探针杂交至目标核酸; b)层析片之接触端与样品溶液接触,使样品溶液藉 由毛细作用移至捕获带,藉此由层析片释放帮手探 针,故当样品溶液移动于捕获带时,可使释放之帮 手探针杂交至样品溶液中之目标核酸,以致含有目 标核酸及帮手探针之复合物可藉由捕获探针杂交 至复合物之目标核酸而于捕获带被捕获;及 c)检查捕获带上目标核酸之存在。 26.一种测试样品溶液中目标核酸存在之方法,其包 含: a)提供一种层析片,其具有:接触端以接触样品溶液 ;一种固定于层析片捕获带(位于接触端之另一端) 的捕获部分;以及一种捕获探针,可释放地固定于 层析片接触端及捕获带之间,捕获探针能够杂交至 目标核酸,且当捕获探针已杂交至目标核酸,能够 藉由捕获部分被连结; b)培育样品溶液与: 一种帮手探针,其在帮手探针杂交至目标核酸之条 件下,能杂交至目标核酸,藉此可增强捕获探针杂 交至目标核酸;且 c)层析片之接触端与样品溶液接触,使样品溶液藉 由毛细作用移至捕获带,藉此由层析片释放捕获探 针,故当样品溶液移动于捕获带时,可使释放之捕 获探针杂交至样品溶液中之目标核酸,以致含有目 标核酸、捕获探针及帮手探针之复合物可藉由捕 获部分结合至复合物之捕获探针而于捕获带被捕 获;及 d)检查捕获带上目标核酸之存在。 27.一种测试样品溶液中目标核酸存在之方法,其包 含: a)提供一种层析片,其具有:接触端以接触样品溶液 ;一种固定于层析片之捕获带(位于接触端之另一 端)的捕获部分;一种捕获探针可释放地固定于层 析片接触端及捕获带之间,捕获探针能够杂交至目 标核酸,且当捕获探针已杂交至目标核酸,能够被 捕获部分结合;以及一种帮手探针可释放地固定于 层析片接触端及捕获带之间,帮手探针能够杂交至 目标核酸,藉此增强捕获探针杂交至目标核酸;且 b)层析片之接触端与样品溶液接触,使样品溶液藉 由毛细作用移至捕获带,藉此由层析片释放捕获探 针及帮手探针,故当样品溶液移动于捕获带时,可 使释放之捕获探针及帮手探针杂交至样品溶液中 之目标核酸,以致含有目标核酸、捕获探针及帮手 探针之复合物可藉由捕获部分结合至复合物之捕 获探针而于捕获带被捕获;及 c)检查捕获带上目标核酸之存在。 28.一种测试样品溶液中目标核酸存在之方法,其包 含: a)提供一种层析片,其具有:接触端以接触样品溶液 ;一种固定于层析片捕获带(位于接触端之另一端) 的捕获探针,该捕获探针能够杂交至目标核酸;以 及一种侦测探针可释放地固定于层析片接触端及 捕获带之间,侦测探针能够杂交至目标核酸,因此 可利用侦测探针来直接或间接侦测目标核酸; b)培育样品溶液与: 一种帮手探针,其能够杂交至目标核酸,藉此可增 强侦测探针杂交至目标核酸,样品溶液及帮手探针 是在帮手探针杂交至目标核酸之条件下培育; c)层析片之接触端与样品溶液接触,使样品溶液藉 由毛细作用移至捕获带,藉此由层析片释放侦测探 针,故当样品溶液移动于捕获带时,可使释放之侦 测探针杂交至样品溶液中之目标核酸,以致含有目 标核酸、帮手探针及侦测探针之复合物可藉由捕 获探针杂交至复合物之目标核酸而于捕获带被捕 获;及 d)检查捕获带上侦测探针之存在。 29.一种测试样品溶液中目标核酸存在之方法,其包 含: a)提供一种层析片,其具有:接触端以接触样品溶液 ;一种固定于层析片之捕获带(位于接触端之另一 端)的捕获探针,该捕获探针能够杂交至目标核酸; 以及一种侦测探针可释放地固定于层析片接触端 及捕获带之间,侦测探针能够杂交至目标核酸,因 此可利用侦测探针来直接或间接侦测目标核酸;以 及一种帮手探针可释放地固定于层析片接触端及 捕获带之间,帮手探针能够杂交至目标核酸,藉此 增强侦测探针杂交至目标核酸;且 b)层析片之接触端与样品溶液接触,使样品溶液藉 由毛细作用移至捕获带,藉此由层析片释放帮手探 针及侦测探针,故当样品溶液移动于捕获带时,可 使释放之帮手探针及侦测探针杂交至样品溶液中 之目标核酸,以致含有目标核酸、帮手探针及侦测 探针之复合物可藉由捕获探针杂交至复合物之目 标核酸而于捕获带被捕获;及 c)检查捕获带上侦测探针之存在。 30.一种测试样品溶液中目标核酸存在之方法,其包 含: a)提供一种层析片,其具有:接触端以接触样品溶液 ;一种固定于层析片之捕获带(位于接触端之另一 端)的捕获部分;以及一种捕获探针可释放地固定 于层析片接触端及捕获带之间,侦测探针能够杂交 至目标核酸,且当捕获探针已杂交至目标核酸,能 够被捕获部分结合; b)培育样品溶液与: 一种侦测探针,能够杂交至目标核酸,因此可利用 侦测探针来直接或间接侦测目标核酸,侦测探针与 样品溶液是在侦测探针杂交至目标核酸之条件下 培育;以及 一种帮手探针,能够杂交至目标核酸,藉此增强侦 测探针杂交至目标核酸,样品溶液与侦测探针是在 帮手探针杂交至目标核酸之条件下培育; c)层析片之接触端与样品溶液接触,使样品溶液藉 由毛细作用移至捕获带,藉此由层析片释放捕获探 针,故当样品溶液移动于捕获带时,可使释放之捕 获探针杂交至样品溶液中之目标核酸,以致含有目 标核酸、捕获探针、帮手探针及侦测探针之复合 物可藉由捕获部分结合至复合物之捕获探针而于 捕获带被捕获;及 d)检查捕获带上侦测探针之存在。 31.一种测试样品溶液中目标核酸存在之方法,其包 含: a)提供一种层析片,其具有:接触端以接触样品溶液 ;一种固定于层析片之捕获带(位于接触端之另一 端)的捕获部分;以及一种侦测探针可释放地固定 于层析片接触端及捕获带之间,侦测探针能够杂交 至目标核酸,因此可利用侦测探针来直接或间接侦 测目标核酸; b)培育样品溶液与: 一种捕获探针,在捕获探针杂交至目标核酸之条件 下,能够杂交至目标核酸,且当捕获探针已杂交至 目标核酸时,能够被捕获部分结合;以及 一种帮手探针,在帮手探针杂交至目标核酸之条件 下,能够杂交至目标核酸,藉此增强侦测探针杂交 至目标核酸; c)层析片之接触端与样品溶液接触,使样品溶液藉 由毛细作用移至捕获带,藉此由层析片释放侦测探 针,故当样品溶液移动于捕获带时,可使释放之侦 测探针杂交至样品溶液中之目标核酸,以致含有目 标核酸、捕获探针、帮手探针及侦测探针之复合 物可藉由捕获部分结合至复合物之捕获探针而于 捕获带被捕获;及 d)检查捕获带上侦测探针之存在。 32.一种测试样品溶液中目标核酸存在之方法,其包 含: a)提供一种层析片,其具有:接触端以接触样品溶液 ;一种固定于层析片之捕获带(位于接触端之另一 端)的捕获部分;一种侦测探针可释放地固定于层 析片接触端及捕获带之间,侦测探针能够杂交至目 标核酸,因此可利用侦测探针来直接或间接侦测目 标核酸;以及一种帮手探针可释放地固定于层析片 ,帮手探针能够杂交至目标核酸,藉此增强侦测探 针杂交至目标核酸; b)培育样品溶液与: 一种捕获探针,能够杂交至目标核酸,且当捕获探 针已杂交至目标核酸时,能够被捕获部分结合,捕 获探针与样品溶液是在捕获探针杂交至目标核酸 之条件下培育;以及 一种帮手探针,能够杂交至目标核酸,藉此增强侦 测探针杂交至目标核酸,帮手探针与样品溶液是在 帮手探针杂交至目标核酸之条件下培育; c)层析片之接触端与样品溶液接触,使样品溶液藉 由毛细作用移至捕获带,藉此由层析片释放侦测探 针及帮手探针,故当样品溶液移动于捕获带时,可 使释放之侦测探针及帮手探针杂交至样品溶液中 之目标核酸,以致含有目标核酸、捕获探针、帮手 探针及侦测探针之复合物可藉由捕获部分结合至 复合物之捕获探针而于捕获带被捕获;且 d)检查捕获带上侦测探针之存在。 33.一种测试样品溶液中目标核酸存在之方法,其包 含: a)提供一种层析片,其具有:接触端以接触样品溶液 ;一种固定于层析片之捕获带(位于接触端之另一 端)的捕获部分;一种侦测探针可释放地固定于层 析片接触端及捕获带之间,侦测探针能够杂交至目 标核酸,因此可利用侦测探针来直接或间接侦测目 标核酸;以及一种捕获探针可释放地固定于层析片 接触端及捕获带之间,捕获探针能够杂交至目标核 酸,且当捕获探针已杂交至目标核酸时,能够被捕 获部分结合; b)培育样品溶液与一种帮手探针,该帮手探针能够 杂交至目标核酸,藉此增强侦测探针杂交至目标核 酸,帮手探针与样品溶液是在帮手探针杂交至目标 核酸之条件下培育; c)层析片之接触端与样品溶液接触,使样品溶液藉 由毛细作用移至捕获带,藉此由层析片释放侦测探 针及捕获探针,故当样品溶液移动于捕获带时,可 使释放之侦测探针及捕获探针杂交至样品溶液中 之目标核酸,以致含有目标核酸、捕获探针、帮手 探针及侦测探针之复合物可藉由捕获部分结合至 复合物之捕获探针而于捕获带被捕获;且 d)检查捕获带上侦测探针之存在。 34.一种测试样品溶液中目标核酸存在之方法,其包 含: a)提供一种层析片,其具有:接触端以接触样品溶液 ;一种固定于层析片之捕获带(位于接触端之另一 端)的捕获部分;一种侦测探针可释放地固定于层 析片接触端及捕获带之间,侦测探针能够杂交至目 标核酸,因此可利用侦测探针来直接或间接侦测目 标核酸;一种帮手探针可释放地固定于层析片接触 端及捕获带之间,帮手探针能够杂交至目标核酸, 藉此增强侦测探针杂交至目标核酸;以及 一种捕获探针可释放地固定于层析片接触端及捕 获带之间,捕获探针能够杂交至目标核酸,且当捕 获探针已杂交至目标核酸时,能够被捕获部分结合 ; b)层析片之接触端与样品溶液接触,使样品溶液藉 由毛细作用移至捕获带,藉此由层析片释放侦测探 针、帮手探针及捕获探针,故当样品溶液移动于捕 获带时,可使释放之侦测探针、帮手探针及捕获探 针杂交至样品溶液中之目标核酸,以致含有目标核 酸、捕获探针、帮手探针及侦测探针之复合物可 藉由捕获部分结合至复合物之捕获探针而于捕获 带被捕获;且 c)检查捕获带上侦测探针之存在。 35.一种测试疑似含有目标核酸之样品溶液中目标 核酸存在之套组,包含: i)一种检棒,包括: 一种具有用以接触样品溶液之接触端的层析片;及 一种固定于捕获带接触端另一端之捕获探针,捕获 探针能够杂交至目标核酸第一序列; ii)一种能够杂交至目标核酸第二序列帮手探针,因 此增强捕获探针杂交至目标核酸,以及可含有 iii)一种能够连接至目标核酸之侦测探针,而可直 接或间接侦测目标核酸。 36.如申请专利范围第35项之套组,其中帮手探针可 释放地固定于层析片接触端与捕获带之间。 37.一种测试疑似含有目标核酸之样品溶液中目标 核酸存在之套组,包含: i)一种检棒,包括: 一种具有用以接触样品溶液之接触端的层析片;及 一种固定于捕获带接触端另一端之捕获探针,捕获 探针能够杂交至目标核酸第一序列; ii)一种能够杂交至目标核酸第二序列之侦测探针, 而可直接或间接侦测目标核酸;以及 iii)一种能够杂交至目标核酸第三序列之帮手探针 ,藉此增强侦测探针杂交至第二序列。 38.如申请专利范围第37项之套组,其中侦测探针可 释放地固定于层析片接触端与捕获带之间。 39.如申请专利范围第37项之套组,其中侦测探针及 帮手探针可释放地固定于层析片接触端与捕获带 之间。 40.一种测试疑似含有目标核酸之样品溶液中目标 核酸存在之套组,包含: i)一种检棒,包括: 一种具有用以接触样品溶液之接触端的层析片;及 一种固定于捕获带接触端另一端之捕获部分; ii)一种能够杂交至目标核酸第一序列之捕获探针, 且当捕获探针已杂交至目标核酸第一序列,其能够 被捕获部分结合; iii)一种能够杂交至目标核酸第二序列之帮手探针 ,藉此增强捕获探针杂交至第一序列;以及可含有 iv)一种能够连接至目标核酸之侦测探针,而其可直 接或间接侦测目标核酸。 41.如申请专利范围第40项之套组,其中捕获探针可 释放地固定于层析片接触端与捕获带之间。 42.如申请专利范围第40项之套组,其中捕获探针及 帮手探针可释放地固定于层析片接触端与捕获带 之间。 43.一种测试疑似含有目标核酸之样品溶液中目标 核酸存在之套组,包含: i)一种检棒,包括: 一种具有用以接触样品溶液之接触端的层析片;及 一种固定于捕获带接触端另一端之捕获部分; ii)一种能够杂交至目标核酸第一序列之捕获探针, 且当捕获探针已杂交至第一序列,其能够被捕获部 分结合; iii)一种能够杂交至目标核酸第二序列之侦测探针 ,而其可直接或间接侦测目标核酸;以及 iv)一种能够杂交至目标核酸第三序列之帮手探针, 藉此增强侦测探针杂交至第二序列。 44.如申请专利范围第43项之套组,其中捕获探针及/ 或侦测探针可释放地固定于层析片接触端与捕获 带之间。 45.如申请专利范围第43项之套组,其中帮手探针及 侦测探针与任意的捕获探针可释放地固定于层析 片接触端与捕获带之间。 46.一种测试样品溶液中目标核酸存在之层析片,包 含: 用以接触样品溶液之接触端;固定于捕获带接触端 另一端之捕获探针,捕获探针能够杂交至目标核酸 ;及可释放地固定于层析片接触端与捕获带之间的 帮手探针,帮手探针能够杂交至目标核酸,藉此增 强捕获探针杂交至目标核酸。 47.一种测试样品溶液中目标核酸存在之层析片,包 含: 用以接触样品溶液之接触端;固定于捕获带接触端 另一端之捕获探针,捕获探针能够杂交至目标核酸 ;及可释放地固定于层析片接触端与捕获带之间的 帮手探针,帮手探针能够杂交至目标核酸,藉此增 强侦测探针杂交至目标核酸。 48.一种测试样品溶液中目标核酸存在之层析片,包 含: 用以接触样品溶液之接触端; 固定于捕获带接触端另一端之捕获部分,捕获部分 能够结合杂交于目标核酸的捕获探针; 可释放地固定于层析片接触端与捕获带之间的捕 获探针,捕获探针能够杂交至目标核酸,及任意地 可释放地固定于层析片接触端与捕获带之间的帮 手探针,帮手探针能够杂交至目标核酸,藉此增强 捕获探针杂交至目标核酸。 49.一种测试样品溶液中目标核酸存在之层析片,包 含: 用以接触样品溶液之接触端; 固定于捕获带接触端另一端之捕获部分,捕获部分 能够结合杂交于目标核酸的捕获探针; 可释放地固定于层析片接触端与捕获带之间的侦 测探针,侦测探针能够杂交至目标核酸,因此可利 用侦测探针来直接或间接侦测目标核酸;以及可含 有 i)可释放地固定于层析片接触端与捕获带之间的 捕获探针,捕获探针能够杂交至目标核酸,且能够 被捕获部分结合;及/或 ii)一种帮手探针能够杂交至目标核酸,藉此增强侦 测探针杂交至目标核酸。 50.一种实质上经分离之核酸分子或核酸类似物,其 具有之序列相对应于任一SEQ ID NOS:1-18之序列,其可 使用作为帮手探针,于样品溶液中砂眼衣原体( Chlamydia trachomatis, CT)目标核酸存在之测试中增强CT 目标核酸的侦测,其中该SEQ ID NOS:1-18如下所示: HP SEQ ID No 1: 5' GAT AAA ATC CCT TTA CCC ATG AAA HP SEQ ID No 1': 5' CTT GCT GCA AAG ATA AAA TCC CTT HP SEQ ID No 2: 5' TAA AAT GTC CTG ATT AGT GAA ATA AT HP SEQ ID No 3: 5' TCG GTA TTT TTT TAT ATA AAC ATG AAA A HP SEQ ID No 4: 5' TGC AAG ATA TCG AGT ATG CGT TGT TA HP SEQ ID No 5: 5' AAA GGG AAA ACT CTT GCA GA HP SEQ ID No 6: 5' TCT TTT CTA AAG ACA AAA AAG ATC CTC GAT SEQ ID No 7: 5' CTT GCT GCT CGA ACT TGT TTA GTA C SEQ ID No 8: 5' AGA AGT CTT GGC AGA GGA AAC TTT T SEQ ID No 9: 5' CTA GAA TTA GAT TAT GAT TTA AAA GGG SEQ ID No 10: 5' TTC ATA TCC AAG GAC AAT AGA CCA A SEQ ID No 11: 5' TGA TCT ACA AGT ATG TTT GTT GAG T SEQ ID No 12: 5' TGC ATA ATA ACT TCG AAT AAG GAG AAG SEQ ID No 13: 5' TCC CTC GTG ATA TAA CCT ATC CG SEQ ID No 14: 5' CAG GTT GTT AAC AGG ATA GCA CGC SEQ ID No 15: 5' CTC GTT CCG AAA TAG AAA ATC GCA SEQ ID No 16: 5' GGT AAA GCT CTG ATA TTT GAA GAC SEQ ID No 17: 5' CTG AGG CAG CTT GCT AAT TAT GAG T SEQ ID No 18: 5' GTT GGC AAA AAT AGA CAT GGA TCG G。 图式简单说明: 第1图显示依照本发明之具体例使用检棒以侦测目 标核酸; 第2图列出依照本发明使用之帮手探针序列; 第3图显示实例1的实验构成; 第4图显示实例2的实验构成; 第5图显示实例3的实验构成; 第6图显示实例4的实验构成; 第7图显示实例5的实验构成; 第8图显示实例6的实验构成; 第9图显示单一步骤杂交分析之结果;
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