| 摘要 |
Un método para producir una proteína heteróloga secretada a partir de células CHO desarrolladas sobre microportadores, que comprende los pasos de: * inocular un biorreactor celular, que contiene microportadores como un soporte sólido para crecimiento de células adherentes y medio de cultivo de células que contiene suero, con un inóculo de células hospedadoras CHO transformadas para expresar una proteína heteróloga secretada, en donde el inóculo se ha preparado por crecimiento de las células hospedadoras VHO transformadas en medio de cultivo de células que contiene suero; * cultivar las células hospedadoras CHO inoculadas en cultivo de células adherentes sin perfusión del medio de cultivo de células durante un período comprendido en el intervalo de aproximadamente 1 a 3 días; * iniciar una alimentación de medio de cultivo de células exento de suero complementado con insulina, citrato férrico, selenio y elementos traza al biorreactor celular por perfusión continua a un régimen comprendido en el intervalo de aproximadamente 0,1 a 0,4 volúmenes/volumen/día; * aumentar el régimen de alimentación de medio de cultivo de células exento de suero complementado con insulina, citrato férrico, selenio y elementos traza por etapas a lo largo de aproximadamente un período de 6 a 10 días hasta que se alcanza un régimen de alimentación final en un intervalo de aproximadamente 1 a 3, 5 volúmenes/volumen/día para producir y secretar una proteína heteróloga a partir de las células hospedadoras CHO en el medio de cultivo de células exento de suero; y * cultivar las células CHO en cultivo de células adherentes al régimen de alimentación final.
|
