PROCEDIMIENTO PARA PRODUCIR PROTEINAS POLICLONALES RECOMBINANTES.

摘要

Un procedimiento para generar una colección de células adecuadas como una línea de células de producción policlonal recombinante, dicho procedimiento comprende: a) proporcionar una biblioteca de vectores que comprenden una población de secuencia de ácido nucleico variante, en donde cada uno de los vectores comprende: 1) una copia única de una secuencia de ácido nucleico diferente que codifica para un miembro diferente de una proteína policlonal que comprende miembros diferentes que unen un antígeno particular, y 2) una o mas secuencias de reconocimiento de recombinasa; b) introducir dicha biblioteca de vectores en una línea de células hospederas, en donde el genoma de cada célula individual de la línea de células hospederas comprende secuencias de reconocimiento de recombinasa, hacer coincidir estas con el vector en un sitio específico único en su genoma; c) asegurar la presencia en dichas células de una o más recombinasas de manera que las secuencias de ácido nucleicovariante de la etapa (a) se integren de manera especifica en el sitio en las células de la línea de células hospederas en, donde una o más de las recombinasas: i) se expresa por las células en las cuales se ha introducido la secuencia de ácido nucleico; ii) están codificadas operativamente por los vectores de la etapa a, iii) se proporcionan a través de la expresión de un segundo vector; o iv) se proporcionan a la célula como una proteína, y d) seleccionar células que comprenden una copia integrada de dicha biblioteca de las secuencias de ácido nucleico variante.