长链型重组人骨形态发生蛋白－2及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种长链型重组人骨形态发生蛋白－2及其制备方法和应用。本发明利用基因工程技术在大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等表达系统中制备长链型重组人骨形态发生蛋白－2。本发明以人骨肉瘤细胞mRNA逆转录得到的cDNA为模板，扩增出编码羧基端自然结构成熟肽完整114个氨基酸的核苷酸序列，并在正向引物5’端第一个密码子之前增加一段核苷酸，使其对应的氨基酸序列在N端增加一段多肽，得到长链型rhBMP－2基因，分子量约为30KD，纯度达95％以上。该长链型rhBMP－2具有活性高、体内稳定性好，利于重组蛋白的表达、复性和分离纯化，利于活性蛋白在体内的稳定及活性的稳定发挥，适合于骨缺损填充、融合植骨等，尤其适合于椎体融合、骨折延迟愈合、骨不连、大段骨缺损的填充修复。

主权项

1.一种长链型重组人骨形态发生蛋白-2，其特征在于，是由人骨形态发生蛋白-2成熟肽的114个氨基酸和连接在所述的氨基酸的N端的氨基酸的多肽链构成，所说的多肽链为Met Lys Arg His Asp Gly Lys Gly His Pro Leu His Lys Arg Glu Lys Arg，或以以上肽链为基础的较短的多肽链。