发明名称 一种分子克隆快速鉴定方法
摘要 本发明提供一种分子克隆快速鉴定方法,包括:一快速提取质粒,二单酶多切和RNA消化。快速提取质粒能够在一毫升左右的菌液中,约半个小时内得到满足克隆鉴定的质粒量。单酶多切和RNA消化是对前面提取的质粒,经单一的限制性内切酶把目的碱基序列片段,或者部分碱基序列片段切割下来,组成多个限制性内切酶位点,同时用RNA酶消化RNA,经电泳,完成阳性克隆的鉴定。本发明方法仅需半天时间就可完成阳性克隆质粒鉴定,表现出了高效率的特点,是一种操作更简单、方便,效率更高,试剂等耗费很少的完善分子克隆技术的快速鉴定方法。
申请公布号 CN1312292C 申请公布日期 2007.04.25
申请号 CN200410067739.0 申请日期 2004.10.28
申请人 浙江大学医学院附属第二医院 发明人 郑树;陈功星;张佳炜
分类号 C12Q1/68(2006.01) 主分类号 C12Q1/68(2006.01)
代理机构 杭州求是专利事务所有限公司 代理人 赵杭丽;张法高
主权项 1.一种分子克隆快速鉴定方法,包括(1)快速提取质粒、(2)单酶多切,其特征是:还包括(3)RNA消化,在进行单个限制性内切酶多切的同时,用RNA酶消化RNA,在步骤(1)中,离心收集培养过的质粒转化细菌液体,是收集单克隆经摇床培养5~8小时的细菌液体。
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