发明名称 | 一种分子克隆快速鉴定方法 | ||
摘要 | 本发明提供一种分子克隆快速鉴定方法,包括:一快速提取质粒,二单酶多切和RNA消化。快速提取质粒能够在一毫升左右的菌液中,约半个小时内得到满足克隆鉴定的质粒量。单酶多切和RNA消化是对前面提取的质粒,经单一的限制性内切酶把目的碱基序列片段,或者部分碱基序列片段切割下来,组成多个限制性内切酶位点,同时用RNA酶消化RNA,经电泳,完成阳性克隆的鉴定。本发明方法仅需半天时间就可完成阳性克隆质粒鉴定,表现出了高效率的特点,是一种操作更简单、方便,效率更高,试剂等耗费很少的完善分子克隆技术的快速鉴定方法。 | ||
申请公布号 | CN1312292C | 申请公布日期 | 2007.04.25 |
申请号 | CN200410067739.0 | 申请日期 | 2004.10.28 |
申请人 | 浙江大学医学院附属第二医院 | 发明人 | 郑树;陈功星;张佳炜 |
分类号 | C12Q1/68(2006.01) | 主分类号 | C12Q1/68(2006.01) |
代理机构 | 杭州求是专利事务所有限公司 | 代理人 | 赵杭丽;张法高 |
主权项 | 1.一种分子克隆快速鉴定方法,包括(1)快速提取质粒、(2)单酶多切,其特征是:还包括(3)RNA消化,在进行单个限制性内切酶多切的同时,用RNA酶消化RNA,在步骤(1)中,离心收集培养过的质粒转化细菌液体,是收集单克隆经摇床培养5~8小时的细菌液体。 | ||
地址 | 310009浙江省杭州市上城区解放路88号 |