发明名称 |
生产重组尿激酶的方法 |
摘要 |
本发明提供生产正确折叠的重组尿激酶的高效方法。该方法首先通过用高pH离液剂溶解蛋白质,其后通过在低浓度离液剂存在下缓慢降低pH使变性的重组尿激酶原再折叠。 |
申请公布号 |
CN1311076C |
申请公布日期 |
2007.04.18 |
申请号 |
CN03134847.5 |
申请日期 |
2003.09.25 |
申请人 |
普罗特奥姆技术公司 |
发明人 |
蔺新力 |
分类号 |
C12N9/72(2006.01);C07K1/14(2006.01) |
主分类号 |
C12N9/72(2006.01) |
代理机构 |
北京市中咨律师事务所 |
代理人 |
黄革生;林柏楠 |
主权项 |
1.生产再折叠重组尿激酶原的方法,其包括:(a)用溶解缓冲液溶解变性的尿激酶原蛋白质,所述溶解缓冲液包含高浓度的离液剂、还原剂,并且其具有9.0到11.0的pH,由此产生溶解的尿激酶原溶液;(b)通过将上述溶解的尿激酶原溶液加至再折叠缓冲液中将上述溶解的尿激酶原溶液用再折叠缓冲液快速稀释,由此产生稀释的溶解的尿激酶原溶液,其中所述的再折叠缓冲液包含尿素和精氨酸或者包含盐酸胍和精氨酸;(c)将稀释的溶解的尿激酶原溶液的pH降低至7.5到8.5,其中所述pH的降低用至少20小时的时间完成,由此产生再折叠的尿激酶原。 |
地址 |
美国加利福尼亚州 |