快速检测灿烂弧菌的PCR方法

摘要

本发明公开一种快速检测灿烂弧菌的方法，有如下步骤：a.将25μlPCR反应试剂置入PCR管中，反应试剂中的上游、下游引物分别是VsF：5′－GGACGGGTGAGTAATGCCTAG－3′；VsR：5′－GTTAGCCGGTGCTTCTTCTG－3′；b.将微量的待检测样品放入a步骤所述的PCR管中，应用PCR仪进行扩增反应，反应条件为：94℃预变性4min，然后进行如下30个循环：94℃变性50s，56℃退火50s，72℃延伸50s；最后72℃延伸5min，4℃保存；c.取5μl b步骤的PCR产物与6×PCR上样缓冲液混合，在加入溴化乙锭染色的1％琼脂糖凝胶电泳中以DNA分子量标记对照进行检测。具有检测速度快、灵敏度高、成本低等优点。

主权项

1.一种快速检测灿烂弧菌的PCR方法，其特征在于有如下步骤：a.将25μl PCR反应试剂置入0.2ml PCR管中，反应试剂中的上游、下游引物分别是：VsF：5′-GGACGGGTGAGTAATGCCTAG-3′；VsR：5′-GTTAGCCGGTGCTTCTTCTG-3′；b.将微量的待检测样品放入a步骤所述的PCR管中，应用PCR仪进行扩增反应，反应条件为：94℃预变性4min，然后进行如下30个循环：94℃变性50s，56℃退火50s，72℃延伸50s；最后72℃延伸5min，4℃保存。c.取5μl b步骤的PCR产物与6×PCR上样缓冲液混合，在加入溴化乙锭染色的1％琼脂糖凝胶电泳中以DNA分子量标记作为对照进行检测。